■2-22 ANNALES DE L'INSTITTIT PASTEUR. 



Voici le plan de campagne que je me suis tracé au début : 



1° Commencer par rechercher les conditions de culture en 

 liquides nutritifs éminemment favorables à la nitrification et 

 défavorables aux phénomènes réducteurs; 



2'^ En tenant ces conditions constantes, faire une suite de 

 cultures assez longue pour éliminer toutes les espèces qui ne 

 sont pas adaptées aux conditions favorables à la nitrification; 



3° Quand on aurait constaté que le peuplement des cultures 

 est épuré à tel point qu'il ne change plus, la nitrification restant 

 toujours très intense, alors seulement procéder à l'isolement 

 de toHles les espèces qui s'y trouvent, et essayer en culture pure 

 leur pouvoir nitrifiant. 



Le premier liquide nutritif employé était une solution de 

 sels minéraux : phosphate de potasse, sulfate de magnésie, 

 carbonate de potasse (à 3 pour mille,) additionnée du chlorhy- 

 drate d'ammoniaque destiné à subir la nitrification, et de 

 tartrate de potasse (à 0, 1 pour cent) , comme aliment hydro- 

 carboné. Pour mettre en train la nitrification, on se servait de 

 deux échantillons de terre de Zurich : l'une, du terreau très 

 riche en matière organique, l'autre, du terreau pauvre en 

 matière organique, mais riche en carbonates terreux. On en 

 introduisait des quantités différentes dans des matras à fond 

 plat d'un diamètre exceptionnellement large, qui contenaient le 

 liquide en couche peu épaisse. 



Les premiers essais furent très peu satisfaisants. La nitrifi- 

 cation tardait à s'emparer des liquides. Au bout d'une semaine, 

 de dix jours, on ne constatait qu'une réaction très faible avec la 

 diphénylamine. Cette lenteur me parut suspecte. Evidemment 

 les conditions de culture étaient peu favorables à l'action des 

 organismes nitrifiants. On varia le degré d'alcalinité , les 

 quantités de sel ammoniacal ; on essaya des sels ammoniacaux 

 différents, mais sans succès apparent. L'idée me vint alors de 

 supprimer toute addition de matière organique, et le résultat 

 immédiat fut une nitrification très intense. 



Il est depuis longtemps connu que la richesse du milieu en 

 matière organique est peu propice à la nitrification. M. Heraeus 

 a observé aussi des faits qui semblent démontrer que toute 

 addition de substance hydrocarbonée, du moins en cultures 

 impures, est peu favorable au phénomène. Moi-même j'ai 



