224 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



les cnllures, ne donnaient au bout de deux semaines qu'une 

 réaction à peine perceptible, qui n'augmentait d'intensité 

 qu'insensiblement. 



Je me mis alors à l'étude des organismes qui peuplaient 

 mes cultures. Déjà, par l'examen microscopique direct, on 

 s'assura qu'il y en avait plusieurs espèces; le procédé des 

 plaques de gélatine en révéla beaucoup. Quelques-unes crois- 

 saient rapidement dans le milieu solide en le liquéfiant. Ces 

 espèces m'intéressaient peu, car elles tendaient visiblement à 

 disparaître, leurs germes étant déjà devenus et devenant de 

 plus en plus rares dans les cultures successives. Cependant, je 

 fis avec quelques-unes d'entre elles, que je pus identifier à des 

 espèces connues, des expériences de nitrification en culture 

 pure, qui eurent toutes un résultat négatif. 



Enfin, au bout d'à peu près trois mois, le peuplement des 

 liquides en espèces bactériennes était devenu constant. L'étude 

 mJcroscopique soigneuse des colonies qui apparaissaient dans 

 la gélatine ensemencée par quelques gouttes d'une culture 

 nitrifiée, démontra qu'on retrouvait maintenant toujours les 

 mêmes espèces et en mêmes quantités relatives. Evidemment, 

 toutes étaient plus ou moins adaptées aux conditions d'existence 

 qu'elles trouvaient dans mon liquide, très pauvre en matière 

 organique, mais riche en ammoniaque; et si on n'avait encore 

 aucun droit de leur attribuer à toutes le pouvoir nitrifiant, du 

 moins on n'avait plus à espérer d'en réduire le nombre par 

 ce mode d'expérience. 



Le moment était venu de tenter de les isoler toutes, sans en 

 omettre aucune, et d'essayer leur action à l'état pur sur les sels 

 ammoniacaux. On se servit naturellement des méthodes usitées 

 sans toutefois s'y fier absolument. L'idée que le ferment nitrique 

 pourrait être réfractaire à ces méthodes étant toujours présente, 

 on soumettait les liquides à un examen microscopique direct et 

 souvent répété; c'est à lui que je dois, nous le verrons, l'éclair- 

 cissement de la question. 



Je n'insisterai pas sur les espèces que j'ai isolées par le 

 procédé de culture sur gélatine. Elle ne nous intéressent pas 

 pour le moment, leur pouvoir nitrifiant s'étant montré absolu- 

 ment nul. Je me contenterai de les énumérer en les désignant 

 par des lettres grecques. 



