390 ANNALES DE L'INSTITUT PÀSTEUll. 



sant, mais leur croissance était plus lente que celle du microbe 

 spécifique. 



La culture sur sérum réussit très bien avec les fausses 

 membranes desséchées; il suffit de les laisser se ramollir dans 

 un peu d'eau pure, et d'opérer ensuite comme avec des membranes 

 fraîches. Les bacilles secs, en effet, restent vivants pendant très 

 longtemps; à cet état, ils peuvent supporter une tempéra- 

 ture de 95-98° pendant une heure. Lorsqu'on a affaire à des 

 fausses membranes, très chargées de microbes étrangers, qui 

 rendent difficile l'isolement du bacille spécifique, on obtient par- 

 fois de bons résultats en les séchant, puis en les chauffant, avant 

 de les semer, dans l'étuve de Gay-Lussac pendant une demi- 

 heure. Beaucoup de microbes vulgaires sont tués, mais les 

 bacilles diphtériques résistent '. 



Quand on a reconnu, à l'examen microscopique, qu'une 

 colonie est formée de bacilles spécifiques, il faut préparer des 

 cultures pures pour essayer leur action sur les animaux. Les 

 colonies, obtenues par ensemencement direct des fausses mem- 

 branes, contiennent presque toujours quelques germes étrangers; 

 il est nécessaire de les purifier. On y réussit facilement en préle- 

 vant sur l'une d'elles, avec un fil de platine ou de verre, un peu de 

 semence que l'on dilue dans lO*^'^ de bouillon pur, contenus dans 

 un tube à essai: on agite vivement le tube "^ ., de façon à répartir 

 les bacilles dans le liquide, et, avec un fil de platine aplati à 

 l'extrémité, on prend un peu de la dilution pour l'étaler à la 

 surface du sérum. Après 24 heures à l'étuve, les colonies sont 

 très apparentes; elles peuvent servir à faire des inoculations et 

 des ensemencements. Grâce à l'emploi du sérum il est facile, en 

 48 heures, de préparer des cultures pures du bacille de la diphtérie 

 en partant des fausses membranes, et de lever ainsi tous les doutes 

 sur la nature de la maladie. La gélose nutritive ne présente pas 

 les mêmes avantages que le sérum; le bacille spécifique pousse 

 bien sur ce milieu, mais la plupart des microbes qui l'accompa- 

 gnent y croissent au moins aussi rapidement et envahissent 



1. Le streptocoque résiste aussi à ce chauffage, et des fausses membranes ainsi 

 traitées donnent souvent, (|uand on en sème une parcelle dans du bouillon, des 

 cultures pures de streptocoques. 



2. Ce tube de bouillon, qui a servi à préparer la dilution, est misa l'étuve. Si 

 le lendemain il a donné une culture fure, on peut avec elle inoculer des cobayes. 



