7G2 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



songer à offrir toute cette quantité d'un coup, mais par petites 

 portions, à mesure de l'oxydation. Il me paraissait de même 

 peu favorable, pour plusieurs raisons, de laisser vivre les orga- 

 nismes tout le temps dans une seule et même portion du 

 liquide, dont la teneur en nitriles ou nitrates aurait atteint 

 finalement 2 ou 3 Vo- 



Il fallait donc de temps en temps renouveler le milieu, sans 

 rien perdre des organismes actifs. Ceci ne présente pas de 

 difficultés : on filtre, comme je l'ai indiqué dans une autre 

 occasion, le contenu d'une cullure à travers un petit tampon 

 d'amiante calcinée, on lave par un peu d'eau stérilisée; puis le 

 tampon avec le dépôt est saisi par une pincette et jeté dans le 

 liquide frais; on y fait couler ensuite l'eau de lavage de l'enton- 

 noir, pincette, etc.. qu'on essuie encore au besoin par un 

 ilocon d'amiante calcinée, jeté aussi dans le même vase. Ce 

 renouvellement du liquide se faisait chaque 40-50 jours, rare- 

 rement à des intervalles plus long-s. 



Les liquides ayant servi d'habitat au microbe, et ne conte- 

 nant plus trace d'ammoniaque, étaient soumis à l'analyse le 

 plus tôt possible après l'extraction des organismes. On y dosait 

 l'azote nitreux et nitrique, et on en conservait la moitié, après 

 l'avoir stérilisée, pour le dosage du carbone organique en 

 dissolution. 



Je tenais à connaître la production de nitrites et de nitrates 

 pour chaque période de nilrification séparément et non pas seule- 

 ment le total de cette production pour chaque culture; c'est que 

 je changeais de période en période les conditions de culture (aéra- 

 tion, température, excès ou manque de base carbonalée), et je 

 constatais au bout de chaque période si ces influences se tradui- 

 saient par une production plus riche de nitrate ou de nitrite. 

 Chaque période peut donc être considérée, par rapport à cette 

 question, comme une expérience à part. 



Pour terminer, on filtrait une culture une dernière fois, et on 

 en introduisait le dépôt directement dans le ballon de l'appareil 

 de combustion par l'acide chromique' pour doser le carbone, 

 faisant partie des corps des microbes. Pour le dosage du carbone 

 organique en dissolution, on réunissait la moitié de toutes les 



1. Voir ces Annales, 1890, p. 270. . 



