ORGANISMES DE LA NITlllFIGATION. 229 



de nouveau par des expériences répétées qu'il n'était pour 

 rien dans le phénomène de nitrificution. Sa multiplication dans 

 les cultures était tout à fait insiguifiante; on fit des dénombre- 

 ments, et on constata que le nombre de ses germes ne dépassait 

 pas 20 mille par centimètre cube. 



On arrivait ainsi par exclusion à découvrir avec sûreté le 

 ferment nitrique dans le microbe ovale du fond. 11 était démontré 

 aussi que les procédés de culture sur gélatine sont tout à fait 

 impuissants à révéler sa présence. 



Bien plus, ils sont le meilleur moyen pour débarrasser un 

 mélange de microbes du ferment nitrique, s'il y est présent. Il 

 n'y avait plus aucun doute sur la cause des insuccès de mes 

 prédécesseurs. 



Le ferment était maintenant à l'état suffisamment pur pour 

 les expériences de nitrifîcation dans des milieux pauvres ou 

 privés de substances organiques. Il était au moins très pro- 

 bable qu'on n'avait aucun droit d'attribuer une action appréciable 

 quelconque à l'espèce étrangère, présente en quantité si insigni- 

 fiante et à demi épuisée. 



Mais il était nécessaire pour d'autres expériences de débar- 

 rasser complètement le ferment de tout organisme étranger. 

 Après l'avoir épuré à ce point, l'idée d'utiliser pour ce but sa 

 qualité négative de ne pas croître dans la gélatine nutritive 

 paraissait facilement applicable. 



On employa alors la méthode en sens inverse, c'est-à-dire 

 pour déceler les impuretés mêlées aux masses du ferment. 



Le procédé suivant fut adopté : avec un tube capillaire, on pre- 

 nait du fond des matras quelques gouttes contenant des grou- 

 pes de cristaux de carbonate de chaux, collés ensemble en gru- 

 meaux visibles à l'œil nu par les zooglées du ferment. On les jetait 

 dans un ballon rempli d'eau stérilisée. On reprenait de nou- 

 veau ces grumeaux par le tube capillaire : avec un peu de liquide, 

 et on faisait tomber du tube capillaire un certain nombre de 

 gouttes séparées, sur la surface de la gélatine étalée en couche 

 solide*. La gélatine s'imbibait bientôt du liquide des gouttes, 

 mais la place en restait bien marquée par les cristaux du car- 

 bonate de chaux. On laissait ces plaques dix jours k 18" et, au 



1. Je me servais pour celte expérience de ces petits cristallisoirs à couvercle, 

 qui ont été employés la première fois, je crois, par M. Pétri. 



