'268 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Depuis que j'ai connu le ferment nitrique, j'ai été étonné de 

 l'abondance relative de ses végétations dans des liquides presque 

 privés de matière organique. Employait-on au lieu de l'eau 

 naturelle qui en contient toujours un peu, l'eau distillée du 

 laboratoire additionnée des mêmes sels minéraux, il ne parais- 

 sait pas se ressentir du changement. Ce qui était inattendu, ce 

 n'était pas le fait qu'il pouvait s'y multiplier une fois ou deux, 

 mais qu'il le pouvait indéfiniment, c'est dire normalement, car, 

 admettre le contraire, — un état d'épuisement permanent accom- 

 pagné au surplus de multiplication considérable, d'action éner- 

 g'ique, — serait une absurdité. 



Des expériences spéciales ont été exécutées pour établir irré- 

 prochablement ce fait important : j'ai mis tous mes soins à me 

 garantir de toute cause d'erreur possible. Qu'il me soit permis 

 d'énumérer brièvement les précautions extraordinaires que j'ai 

 prises dans une série d'expériences qui a duré quatre mois, pour 

 être sûr d'employer un liquide exempt des dernières traces de 

 substance organique. 



D'abord, tous les vases de culture, ainsi que tous vases ou 

 appareils destinés à servir à la préparation du liquide, ont été 

 nettoyés en y faisant bouillir de l'acide sulfurique (étendu de 

 son volume d'eau) additionné de permanganate ou de bichromate 

 de potasse, ou en 'les lavant par ce mélange bouillant. L'eau 

 dont on se servait pour les cultures et pour les lavages était 

 deux fois distillée, la seconde fois avec addition d'acide sulfurique 

 et de permanganate de potasse, dans un appareil de distillation 

 sans joints de caoutchouc ou de liège, mais entièrement en verre. 

 Quant aux sels, le sulfate de magnésie et le phosphate de potasse 

 ont été calcinés, le carbonate de chaux, dont on mettait un excès 

 dans les cultures, calciné aussi et saturé d'acide carbonique. 

 Enfin, pour me garantir un sel ammoniacal absolument pur, je 

 me suis préparé une solution de sulfate d'ammoniaque en décom- 

 posant du chlorhydrate d'ammoniaque épuré par de la soude 

 caustique, et en saturant par les vapeurs ammoniacales ainsi 

 produites, (la distillation avait lieu dans un appareil entièrement 

 en verre), de l'acide sulfurique .étendu. Cet acide pur futpréala- 



