BACILLE ANALOGUE AU BACILLE DE PFEIFFER. 625 



neutralisée. Nous stérilisions à l'autoclave : puis, pendant le re- 

 froidissement, lorsque la température de la gélose est comprise 

 entre 70° et o0°, on introduit 3 c. c. de sérosité stérile. On opère 

 le mélange par quelques mouvements imprimés aux tubes et on 

 laisse la solidification se faire, en inclinant le tube pour avoir 

 une grande surface. On s'assure de la stérilité en plaçant les 

 tubes 24 à 48 beures à l'étuve avant de s'en servir. L'emploi 

 des tubes nous a paru préférable à l'emploi de boîtes de Pétri, 

 caries chances de contamination par les microbes de l'air sont 

 moins grandes, alors que la surface utilisable de gélose sérum 

 est tout aussi considérable. 



Voici maintenant comment nous obtînmes l'isolement de 

 notre bacille. Après avoir lavé les crachats suivant la méthode 

 de Koch, et ainsi que nous l'avons dit plus haut, nous en préle- 

 vions une petite quantité avec la spatule de platine que nous 

 promenions ensuite à la surface de 6, 8 ou 10 tubes sans repren- 

 dre de la sécrétion. Ces tubes sont placés à l'étuve, à 37°. 



Après 24 heures, les 3 ou 4 premiers tubes sont si chargés 

 de. colonies diverses qu'il n'est pas possible de les utiliser, mais 

 à partir du 4 e ou o e tube, le nombre des colonies apparentes 

 devient très faible. Si l'on examine la surface de la gélose avec 

 une loupe de 15 dioptries, on constate un nombre considérable 

 de petites colonies circulaires, transparentes, faisant une très 

 faible saillie, et presque imperceptibles à l'examen direct. Dans 

 le cas où le bacille en question était abondant dans les sécré- 

 tions bronchiques, nous avons été souvent surpris de voir qu'à 

 partir du 5 e tube aucun développement ne paraissait, à un pre- 

 mier examen, s'être produit, alors que l'examen à la loupe 

 révélait des colonies confluentes et quasi pures du bacille en 

 question. Dans tous les cas il était facile de faire un repiquage 

 de colonies isolées à partir du 4 e , 5 e tube, et d'obtenir, par consé- 

 quent, des cultures pures. 



Examinées au microscope, les colonies développées à la 

 surface de la gélose-sérum affectent une forme régulièrement 

 arrondie et faiblement convexe. Les contours sont assez nets, 

 la colonie est incolore, transparente, et présente un aspect très 

 faiblement granuleux. Ces colonies n'ont pas de noyaux et leur 

 diamètre ne dépasse pas de 1/4 à 1/2 millimètre. Cependant, 

 lorsqu'elles sont très éloignées les unes des autres, leur diamètre 



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