600 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



soigneusement la culture dans le tube même où elle s'est déve- 

 loppée, afin de dissocier autant que possible les écailles sèches 

 formées par l'agglomération des bacilles à la surface de la gélose. 

 En opérant à sec, on obtient facilement ce résultat; on ajoute 

 ultérieurement et peu à peu la quantité de bouillon nécessaire à 

 l'inoculation. On a ainsi un liquide trouble tenant en suspension 

 les bacilles bien isolés. Onpeutencore, pourplusde sûreté, laisser 

 déposer les flocons incomplètement dissociés, dans un verre à 

 pied préalablement stérilisé. 



Chaquelapin, dansmes expériences, recevait deux centimètres 

 cubes d'une pareille émulsion, les cultures étaient toujours jeunes 

 et n'avaient jamais plus d'un mois de date après leur sortie de 

 l'étuve. 



TECHNIQUE DES PREPARATIONS 



Je me suis servi, comme fixateurs, soit du sublimé acide : 



Sublimé à saturation dans l'eau. 

 5 0/0 d'acide acétique cristallisable. 



ou de la liqueur de Flemming : 



Acide chromique à 10/0 i5 grammes. 



Acide osmique à 2 0/0 4 — 



Acide acétique glacial 1 — 



ou d'un mélange de sublimé et de liqueur de Flemming : 



Sublimé à saturation 500 grammes. 



Acide cbromique à 1 0/0 500 — 



Acide osmique 1 — 



Acide acétique glacial 100 — 



Les animaux en expérience étaient sacrifiés par piqûre du 

 bulbe, et les poumons, enlevés immédiatement après la mort, 

 étaient plongés en masse dans le liquide fixateur. 



Pour obtenir des coupes bien étalées, totales et d'une lecture 

 facile, il est indispensable, après la mort de l'animal, et avant 

 l'ouverture delà cage thoracique,de lier la trachée, et d'extirper 

 les poumons entiers; on évite ainsi le trop grand ratatinement, 

 et les alvéoles sont en extension physiologique. 



Le sublimé, additionné d'acide acétique, est un fixateur 



