VIBRIONS DES EAUX ET ÉTIOLOG1E DU CHOLERA. TOI 



Aussi, dans l'espèce, avons-nous eu recours avec grand 

 avantage à la propriété d'après laquelle les vibrions étant 1res 

 aérobies, ont toujours tendance à se multiplier à la surface des 

 liquides nutritifs. 



Profilant de toutes ces connaissances, j'ai procédé à l'iso- 

 lement des vibrions en employant chaque fois de grandes 

 quantités d'eau. D'ordinaire, je versais 200 c. c. de liquide dans 

 un ballon stérilisé, suffisamment volumineux pour que la surface 

 de l'eau eût un large contact avec l'air extérieur; ensuite 

 j'ajoutais 8 c. c. d'un mélange nutritif composé de la manière 

 suivante : 



Gélatine .......................... 20 



Peptone sèche . 10 



Chlorure sodique 10 



Citrate potassique l 



Cette gélatine, préparée d'avance, peut se conserver en 

 grande quantité dans des tubes stérilisés. On choisit la propor- 

 tion de 4-8 c. c, à peu près, dose suffisante pour transformer 

 100-200 c. c. d'eau d'analyse en solution nutritive, composée 

 comme il suit : 



Gélatine 2 



Peptone sèche ..... 1 



Chlorure sodique. • 1 



Mtrate potassique 0.10 



Eau 100 



Dans ces ballons, les vibrions se développent si rapidement, 

 qu'après 12 heures de séjour à l'étuve à 37°, si l'eau n'en con- 

 tient même qu'une petite quantité, ils se présentent à la surface 

 sous forme d'un voile mince et étendu, dont l'examen microsco- 

 pique permet toujours de révéler la présence. 



Pour isoler les vibrions en culture pure, il suffit de prendre 

 avec un fil de platine une petite quantité de cette pellicule, de 

 la délaver dans un tube d'eau stérilisée, et de faire avec cette 

 dilution des plaques de gélatine. On peut aussi faire despassag-es 

 dans l'eau' peptonisée et gélatinisée; on réensemence alors 

 toutes les six heures. Les cultures sont mises dans l'étuve à 37°. 



On obtient facilement ainsi, comme j'ai eu occasion de le 

 vérifier maintes fois, une culture absolument pure des vibrions, 

 grâce au procédé de sélection artificielle qui consiste à transpor- 

 ter rapidement ces derniers dans des milieux successifs, avant 



