ÉTUDES SUR LA TYltOSlNASE. 60 



montré, la coloration tardive était bien du fait deladiastase,etnon 

 de l'intervention accidentelle d'un microbe capable de rougir la 

 tyrosine comme celui que j'ai étudié '. 



D'ailleurs on peut, déjà dans les limites de temps d'une expé- 

 rience ordinaire, se tendre compte des retards que la dilution 

 peut engendrer. Lue solution diastasique qui donnait, à l'état de 

 pureté, la coloration en quelques minutes, diluée au cinquième, 

 l'a fait attendre une demi-heure; au dixième, le retard a atteint 

 une heure. Le même rapport du simple au double, mais entre 

 des dilutions de titre bien plus élevé, du trentième au soixan- 

 tième, a causé une différence de quatre heures et demie dans 

 l'apparition des couleurs-. 



Voici un exemple de proportionnalité en série : 



Une dilution de diastase au tiers exigea 10 'minutes. 



— au quart exigea. ... 1 h. 10. 



— — au cinquième exigea. 1 h. 10. 



— au sixième exigea.. 1 h. i">. 



— au septième exigea. 3 h. 20. 



L'expérience suivante conduit par une autre voie à des effets 

 analogues. Des tubes scellés, contenant des quantités égales de 

 glycérine diastasique. ont été immergés en même temps dans un 

 bain-marie à 68°. De cinq en cinq minutes un tube est retiré. On 

 a ainsi une série de temps croissants de séjour à cette tempéra- 

 ture : progressivement 5, 10, 15, jusqu'à 30 minutes. Il reste 

 encore de la diastase intacte après ce dernier délai, très approché 

 du terme où elle est entièrement détruite. Mais il en a été 

 détruit dans chaque tube une quantité proportionnelle au temps 



1. Comptes rendus de la Soc. de Biologie. 1893, p. 1033. 



Outre que le développement île la couleur diffère suivant son origine micro- 

 bienne ou diastasique, voici comment on peut distinguer les deux cas : la couleur 

 due ,i la diastase, même passée au brun havane et vieille de plusieurs mois, 

 précipite toujours par quelques g nittes de solution d'un sel alcalino-terreux; la 

 couleur due à un microbe ne précipite pas. J'ai vérifié ce moyen de diagnostic, 

 non seulement avec les cultures du microbe que j'ai étudié, mais aussi dans le cas 

 qui n'est pus rare (Bougaou, Soc. de Biologie, isit". p. fc55) d« rosissemenl delà 

 solution de tyrosine exposée à l'air libre et accidentellemenl ensemencée par les 

 germes de l'air. 



■2. Il faut sans doute rattacher à la même cause les faits observés par M. Bour- 

 quelot avec les macérations de divers champignons àtyrosinase: Avec certaines 

 macérations, la coloration se produit presque aussitôt le mélange fait; avec d'au- 

 tres, au contraire, l'opération étant conduite, d'ailleurs, de la même façon, on nu 

 voit apparaître la teinte rouge qu'au boni de 10, V6 minutes et même davantage. » 

 Comptes rendus de la Soc. de Biologie, 18%, p. SU. 



