680 [ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



glacière depuis 44, 47, 51 et 52 jours se sont montrés encore 

 virulents, il y a eu seulement un retard dans l'apparition des 

 Trypanosomes dans le sang des rats inoculés. 



La durée de conservation est beaucoup diminuée si le sang 

 n'a pas été recueilli avec pureté, et si des bactéries s'y développent 

 en grand nombre. 



Les Trypanosomes supportent assez bien une température de 

 41°; à 50° les mouvements se ralentissent rapidement et, au bout 

 de 5 minutes, on ne voit]plus aucun Trypanosome mobile. 



On ne voit jamais apparaître des formes de multiplication 

 dans le sang conservé soit en goutte pendante à la température 

 du laboratoire, soit dans des tubes à la glacière. Comme les 

 Trypanosomes s'agglomèrent sur certains points, on peut avoir 

 parfois l'illusion d'une multiplication des parasites. 



Pour observer les formes de multiplication, il faut examiner 

 le sang d'un rat inoculé depuis 4 à 8 jours : au delà de ce laps 

 de temps on ne trouve plus dans le sang que des Trypanosomes 

 arrivés à leur développement complet ; c'est ainsi que chez les 

 rats d'égout infectés naturellement et, en général, depuis assez 

 longtemps, on chercherait en vain des formes de multiplication. 

 En examinant l'exsudat péritonéal d'un rat inoculé dans le 

 péritoine depuis 24 à 48 heures, on peut voir aussi des formes 

 de multiplication en grand nombre. 



Pour étudier la structure des Trypanosomes, il est indispen- 

 sable d'avoir des préparations colorées et colorées d'après une 

 méthode particulière. La méthode suivante 1 est celle qui nous 

 a donné les meilleurs résultats. 



Le sang est étalé en couche mince sur une lame porte-objet, 

 séché rapidement, et fixé dans l'alcool absolu (10 à 15 minutes). 



Les solutions qui suivent doivent être préparées à l'avance. 

 1° Bleu de méthylène à l'oxyde d'argent ou bleu Borrel. Dans 

 une fiole de 150 c. c. environ, on met quelques cristaux d'azo- 

 tate d'argent et 50 à 60 c. c. d'eau distillée; quand les cristaux 

 sont dissous, on remplit la fiole avec une solution de soude et 

 on agite; il se forme un précipité noir d'oxyde d'argent qui est 

 lavé à plusieurs reprises à l'eau distillée, de manière à enlever 

 l'azotate de soude et l'excès de soude. On verse alors sur 

 l'oxyde d'argent une solutionJaqueuse saturée de bleu de mé- 



i. Laveran, Soc. de biologie, 9 juin 1900. 



