196 ANNALES DE L INSTITUT PASTEUR. 



chaque culture en sac par une culture en bouillon ou sur gélose, 

 aboutissaient invariablement à un atlaiblissement notable de la 

 virulence pour le tube diL'estif. 



Augmentation de la rirulence et sa conservation. — M'inspiiaot 

 des observations (jui précèdent, et ayant constate qu'un virus 

 qui tuait les souris en 4 à 6 jours commençait à passer de l'in- 

 testin dans le sang et s'accumulait surtout dans la rate déjà 

 24 heures après l'ingestion, j'ai réussi à aug-menter sa viru- 

 lence et à le rendre rég-ulièrement pathogène pour les rats, en 

 suivant la méthode suivante : 



Une «"ulture en bouillon, isolée du sang d'une souris sacrifiée 

 24 heures après l'ingestion d'un virus mortel en 4 à 3 jours, est 

 laissée 24 heures à l'étuve, réensemencée dans un nouveau 

 bouillon et distribuée dans des ampoules aussi complètement 

 remplies que possible. 



Les ampoules sont tenues d'abord à l'étuve jusqu'au déve- 

 loppement de la culture, et ensuite à la température ordinaire, 

 jusqu'à formation d'un dépôt et clarification complète du bouillon, 

 ce qui peut durer 4 à 5 jours et a pour but d'habituer le microbe 

 à une vie sans air. 



De l'ampoule on fait passer la culture dans un sac en collo- 

 dion que l'on enferme pour 24 à 36 heures dans la cavité abdo- 

 minale d'un rat, puis on la fait passer de nouveau dans du 

 bouillon ordinaire, et de là encore dans des ampoules. 



La culture de ces dernières ampoules est ensemencée sur 

 gélose, et c'est cette culture sur gélose que l'on donne, de nou- 

 veau, à manger aux souris, après l'avoir délayée dans l'eau et 

 après en avoir imbibé du pain ou du grain. 



On recommence plusieurs fois celte série d'opérations, et on 

 constate déjà au quatrième ou cinquième de ces passages 

 une augmentation de virulence très appréciable. Les souris, qui 

 ne mouraient au début qu'en 4 à 7 jours, meurent 30 à 60 heures 

 après l'ingestion. 



Quand on a obtenu un tel résultat, on peut alors remplacer 

 les souris par des rats blancs, en commençant par des jeunes 

 rais âgés d'un mois à six semaines, et on continue les passages 

 en prenant des rats de plus en plus âgés. 



En procédant ainsi, et en faisant des cultures en sacs dans 

 les cavités abdominales des espèces que l'on veut attemdre, on 



