AddLlTlNATlON AVEC LK P.NEUMUCOUUE. 451 



d'uliliserie sang fourni par 1 application d'une à deux ventouses 

 seariliées. La peau est soij^neusement nettoyée d'abord au savon, 

 puis lavée à l'éther; les ventouses sont préalablement stérilisres 

 au t'oui' à llamber. Le sang une fois recueilli, il vaut mieux le 

 transvaser de suite dans un verre à expérience stérilisé et recou- 

 vert de papier; attendre la coagulation, puis la transsudalion du 

 sérum, et répartir alors en tubes à essai. 



La quantité de sérum nécessaire pour la technique est de 

 1 à 2 c. c. environ. Le sérum ne doit pas être imprégné d'hémo- 

 globine. Les tubes sont alors ensemencés avec une trace de 

 culture de pneumocoque ' et portés à l'étuve à o7" pendant 

 lo à Ki heures. 



Au bout de ce temps, la culture doit être examinée à la fois 

 à lœil nu et au microscope. S'il s'agit de sérum de lapin 

 normal, le milieu est trouble, sans dépôt, et l'examen micros- 

 copique y montre la présence d'innombrables pneumocoques 

 encapsulés, nettement séj)arés les uns des autres et non groupés 

 en amas; s'il sagit de sérum humain normal, le sérum se 

 trouble à peine, et si l'on prélève une goutte pour l'examiner au 

 microscope, on y voit des diplocoques répartis uniformément 

 dans le champ de la préparation, encapsulés, quelquefois 

 groupés bout à bout, de façon à constituer une très courte 

 chaînette de 3 à 4 grains. 



Dans le cas d infection piieumococcique, la culture peut se 

 présenter sous deux aspects principaux : ou bien le sérum est 

 ilemeuré clair, et l'on voit au fond du tube un précipité très net 

 (agglutination mai'roscnpiqae); ou bien le milieu est uniformé- 

 ment trouble, et le microscope est nécessaire pour déceler 

 l'agglutination {agglutination microscoinque). 



1. La conservation de cultures vivantes de pneumocoque a passé longterups 

 puur très difficile, étant donné le pou de longévité de ce luicrobi'. dans les 

 milieux de culture usuels. 



Il est cependant facile de conserver très longtemps le pneumocoque vivant 

 III l'ensemençant dans le sang défibriné, additionné de sérosité d'ascite. Dans ce 

 milieu, le microbe peut rester vivant pendant une année. 



Dans le sang dilué comme dans les milieux contenant de l'hémoglobine, le 

 pneumocoque se développe très souvent en chaînettes; repiqué sur gélose on sur 

 bouillon, le microbe conserve héréditairement cette propriété de se mettre en 

 chaînettes. Il la perd par coatre, si on l'ensemence dans le sérum déjeune lapin 

 où il reprend sa forme typique de diplocoque encapsulé. 



On n'ensemencera donc jamais directement le pm^miocoque venant de sang 

 dilué dans le sérum suspect; il faut toujours le faire passer auparavant, pour lui, 

 rendre sa forme normale, dans le sérum de lapin. 



