8G ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUK. 



Nous comprendrons bientôt les raisons de ces différences. 



^ III. CnUurc et idenlité du microbe de la double face. — Ce 

 nétait pas une besogne facile (|ue celle qui consistait à isoler le 

 microbe de la double face. Quand on fait une culture sur plaque 

 avec le dépôt de lambics, on n'obtient souvent aucun dévelop- 

 pement, soit que les organismes aient vécu, soit qu'ils se trou- 

 vent dans un état de faiblesse telle que leur végétation sur le 

 moût gélatinisé est impossible. Il arrive aussi que les plaques 

 ne donnent que des colonies de levures, de lorulacées et de 

 microl)es vulgaires. Pour léussir à isoler le parasite principal, 

 il est absolument nécessaire d'opérer sur des cellules micro- 

 biennes jeunes et vigoureuses, débarrassées autant que possible 

 des organismes vulgaires. 



Voici la méthode que j'ai suivie : des échanlillons de lam- 

 bics à double face d'origine et d'âge différents sont abandonnés 

 au repos pendant plusieurs semaines dans des bouteilles hermé- 

 tiquement closes, afin de prévenir l'envahissement par les myco- 

 dermes. Quand les bières sont bien dépouillées, on prélève dans 

 chaque llacon, dans les régions supérieures, avec une pipette 

 llaml)ée, un centimètre cube environ de liquide qu'on introduit 

 aussitôt dans un ballon rempli de moût stérilisé et bien clair, en 

 même temps qu'une trace d'une levure à faible atténuation, la 

 levure de Saaz par exemple, et cela dans le but de réserver 

 aux microbes une large part de l'extrait contenu dans la liqueur. 

 On laisse la fermentation se produire et s'achever à la tempé- 

 rature ordinaire. On décante ensuite les bières dans des bou- 

 teilles stérilisées qu'on remplit presque complètement et qu'on 

 bouche avec soin. Ces bières sont abandonnées à elles-mêmes 

 à. la température du laboratoire. Petit à petit, certaines d'entre 

 elles se clarifient, d'autres deviennent visqueuses et à double 

 face, et produisent un dépôt abondant d'une matière blanche 

 zoogléiforme. On délaie la matière zoogléiforme dans du moùl 

 de bière stérile, afin de rajeunir les cellules par une culture de 

 deux ou. trois jours dans ce milieu. On procède enfin à de nou- 

 .velles cultun^s sur plaques sur moût gélatinisé, et les colonies 

 microbiennes obtenues sont introduites dans des ballons de cul- 

 ture contenant du moût stérilisé. 



Au bout de trois jours d'exposition à la température ordi- 

 nairCj le contenu de plusieurs flacons s'est troublé, et l'on voit à 



