218 ANNALES DE LINSTITUÏ PASTEUR 



RECHERCHE DU MILIEU QUI NOUS A PERMIS D'OBTENIR 

 DES COLONIES VISIBLES ET DES CULTURES EN SÉRIE 



Nous avons pensé que le cryptocoque, parasite du cheval, 

 devait végéter dans le fumier. Nous avons donc préparé avec 

 du crottin de cheval un milieu dont la composition est la sui- 

 vante : 



Faire macérera froid pendant 24 heures 400 grammes de crottin de cheval, 

 jjien sec, dans 2 litres d'eau ordinaire. 



Filtrer sur tarlatane, exprimer et filtrer sur papier sans neutraliser. Ajou- 

 ter 10 grammes de peplone et faire dissoudre 18 grammes de gélose pour 

 1.000 cent, cubes du liquide précédent. Stériliser 30 minutes à 120» . Filtrer. 

 Ajouter 40 grammes pour 1.000 de glucose, répartir et stériliser 20 minutes 

 i\ 113». 



Nous avons obtenu le développement des cryptocoques à la 

 surface de ce milieu, en ensemençant par étalement une grosse 

 goutte de pus, prélevée aseptiquement dans un abcès clos des 

 cordons lymphatiques. 



En 48 heures, les grosses formes rondes apparaissent, se 

 chargent de gouttes d'huile et émettent des filaments qui se 

 cloisonnent et s'accroissent pour atteindre une longueur totale 

 de 75 à 100 [>.. 



Bien qu'il n'y eût pas de culture visible, ces résultats réali- 

 saient un progrès important sur nos essais antérieurs : dévelop- 

 pement en surface du parasite, culture plus rapide et beaucoup 

 plus abondante. Mais un très grand nombre d'essais de repi- 

 quage de ces cultures sur le même milieu restèrent toujours 

 sans succès. 



Le contraste entre le développement presque luxuriant des 

 cryptocoques sur ce nouveau milieu au premier ensemen- 

 cement et l'absence de toute culture au second repiquage nous 

 a frappés. Nous avons pensé que cette différence pouvait pro- 

 venir d'un élément qui était introduit en assez grande abon- 

 dance au premier ensemencement, le pus, et qui n'existait plus 

 au second passage. Nous avions remarqué, en effet, que les 

 filaments se développaient dans le pus déposé sur la paroi des 

 tubes de culture, et qu'à la surface de la gélose au crottin, les 

 points d'élection pour la prolifération des tubes étaient toujours 

 les îlots de leucocytes. 



