356 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR 



plat de 1 litre de capacité; mais il fallait prendre la précaution 

 d'ensemencer légèrement, de façon à obtenir quelques îlots de 

 ■mycélium isolés à la surface du liquide; un voile régulier de 

 \ 5 centimètres de diamètre environ, tel que les fioles permettaient 

 d'en obtenir, aurait absorbé, au bout de quelques heures après 

 son apparition, tout l'oxygène disponible. 



C'est ce qui se produit avec le sucre; le mycélium, si légère- 

 ment que l'on ensemence, a une tendance à se développer à la 

 surface du liquide de façon à former un réseau complet, avant 

 de donner naissance à des filaments aériens. Dans ces conditions, 

 l'oxygène est absorbé si vite, qu'on n'en trouve plus de traces 

 dès que le voile devient nettement apparent. 



Pour cette raison, les cultures en milieu sucré ont été faites 

 dans des ballons de 2 litres, à fond rond; on y introduisait seu- 

 lement 50 c. c. de liquide de façon à obtenir peu de surface; on 

 pouvait ainsi laisser la culture se développer jusqu'au 4® jour. 



Mais le procédé n'est pas non plus exempt de tout reproche ; 

 l'inconvénient réside dans l'inégale épaisseur du liquide; le 

 voile se forme d'abord à la périphérie; de plus, le mycélium, qui 

 reste plus longtemps immergé vers le centre, produit de petites 

 quantités d'alcool libre, dont on ne peut pas tenir compte; il y 

 a donc un léger excès d'acide carbonique dû à une transforma- 

 tion dont le champignon n'a probablement pas tiré parti. 



Les fioles et les ballons doivent remplir la double condition 

 de résister au vide et de supporter la stérilisation à 120*^. Ils 

 sont fermés d'un bouchon à deux tubulures, au-dessous duquel 

 on place un fort tampon de coton retenu par un étranglement du 

 col. 



Sur l'une des tubulures on place un tube manométrique 

 dont la branche descendante a 1 mètre de longueur; son extré- 

 mité ouverte plonge dans un petit réservoir de mercure; celui-ci 

 est formé par un petit tube cylindrique de 5 centimètres de 

 hauteur, dans lequel on introduite ou 5 ce. de mercure; il porte 

 une ouverture latérale qui permet la communication avec 

 l'atmosphère; un bouchon à un trou laisse passage au tube 

 manométrique qui vient plonger jusqu'au fond du tube; on a 

 ainsi une colonne de mercure qui permet de suivre très exacte- 

 ment les variations de pression dues à l'absorption ou au dégage- 

 ment de gaz dans l'atmosphère de l'appareil. 



