870 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



alcalin, comme l'a bien fait remarquer Bienstock. Pour avoir 

 un milieu anaérobie on met environ 30 grammes de fibrine 

 pour 2oO grammes de ce liquide dans un ballon à long col, avec 

 une couche d'huile de vaseline. Le tout est stérilisé à 120" ou 

 mieux à 100° pendant trois jours. Le ballon ensemencé est 

 ensuite mis à l'étuve à 37° pendant un temps variable, 15 jours 

 à 1 mois au plus. On procède ensuite à l'analyse. 



Au début de nos recherches, nous avons tenu à suivre exac- 

 tement toutes les méthodes de Bienstock, dont les analyses 

 chimiques, faites par Wallach, sont décrites dans ces An- 

 nales ^ Le procédé consiste dans ses grandes lignes à traiter 

 le liquide de la façon suivante : après distillation et clarification, 

 on filtre, puis on traite par l'éther qui dissout les phénols, 

 l'indol, le scatol et les bases. Le résidu est concentré en pré- 

 sence de NaCO^ puis repris par l'alcool, qui dissout les acides 

 butyrique, valérianique, la leucine, etc. Ce résidu contient en 

 outre l'acide paraoxyphénylpropionique. 



Cetre méthode n'est pas à l'abri de tout reproche. En effet, 

 pour la recherche des acides volatils, on ne les caractérise que 

 par leur odeur ; il nous semble qu'il est préférable d'opérer sui- 

 vant la méthode de Duclaux. Pour la recherche des aminés, nous 

 avons remplacé l'élher sodé par une solution alcoolique sodée 

 de chloroforme (réaction d'Hoffmann). Pour les phénols, leur 

 dosage, leur séparation avec l'indol et le scatol, nous avons 

 suivi le procédé ordinaire. 



Voici, en résumé, comment nous procédons : on ajoute à la 

 culture entière 400 ce. d'eau distillée froide et on laisse en con- 

 tact 24 heures à la glacière, on pèse et on filtre. 



A) Le filtrai obtenu est divisé en cinq parties : 



1° La première sert à l'examen des gaz, à la recherche 

 d'ÏPS. On ajoute de l'acide chlorhydrique et on distille. Le 

 produit est recueilli dans un liquide contenant de l'acétate de 

 plomb qui se colore en brun du fait de ce gaz. On contrôle par 

 la réaction au nitroprussiate de soude en faisant une nouvelle 

 distillation dans un liquide contenant 1 0/0 de ce corps; 



2° La deuxième portion sert à doser les acides volatils, par 

 le procédé de Duclaux; les acides fixes restant dans la cornue 

 sont caractérisés par les méthodes appropi-iées ; 



1. Annales de l'Intititut Pasteur, 25 nov. 1899, n" 11, p. »60. 



