484 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



On peut conclure de ces mesures que, dans la limite de 

 sensibilité du procédé employé, des solutions salines, ayant une 

 même température décongélation, sont isotoniques vis-à-vis des 

 kystes d'amibes. 



VIII 



PRÉPARATION DE LA UIASTASE DES AMIBES 



A. Récolte des amibes. — Lorsqu'on veut récolter les cultures 

 d'amibes cultivées sur gélose dans des boîtes plates de manière 

 à avoir le plus grand nombre possible d'individus mobiles bour- 

 rés de vacuoles digestives, il faut le faire généralement vers le 

 6*^ jour de la culture, alors que la surface de la gélose a pris un 

 aspect uniforme. En attendant plus longtemps, on récolterait 

 surtout des kystes et la culture serait pauvre en diastase. Avec 

 environ 50 c. c. d'eau qu'on agite rapidement à l'intérieur de la 

 boîte, on enlève un très grand nombre d'amibes. On peut s'aider 

 d'un râcloir en verre ou en fil de fer, mais on risque alors, si l'on 

 n'opère avec de grandes précautions, d'enlever un peu de gélose 

 dont on ne se débarrasse qu'incomplètement par des tamisages 

 du liquide. Le liquide chargé d'amibes est porté dans une 

 deuxième boîte, dans une troisième et ainsi de suite. On peut 

 procéder à un second lavage des boîtes. On réunit tous les 

 liquides obtenus. 



On ne peut récolter les amibes sans une masse d'eau relati- 

 vement fort considérable. Il faut ensuite enlever la plus grande 

 partie de cette eau. C'est à quoi l'on arrive par une centrifuga- 

 tion. Les amibes, dont la densité est plus grande cjue celle de 

 l'eau, se précipitent au fond. La précipitation des microbes a 

 lieu aussi, mais elle est beaucoup moins rapide. On peut donc 

 obtenir au fond du tube un dépôt assez cohérent d'amibes alors 

 que le liquide qui surnage et qui en est débarrassé est complète- 

 ment troublé par les bactéries. iVvec la petite centrifugeuse à 

 eau que j'employais, l'opération demandait une heure environ. 

 On doit alors décanter le liquide avec précaution. Au fond du 

 tube, on obtient un dépôt mou, blanc s'il est formé d'amibes 

 mobiles presque exclusivement, au contraire jaune brun à la base 

 s'il contient une assez forte proportion de kystes qui se préci- 



