LA DIGESTION CHEZ LES AMIBES 485 



pilent les premiers. Le dépôt contient encore un assez grand 

 nombre de microbes pour que, si on le délaye dans Teau et qu'on 

 le soumette à une deuxième centrifugation, on obtienne encore 

 au-dessus du dépôt d'amibes un liquide assez trouble. Néan- 

 moins les amibes constituent de beaucoup la masse prépondé- 

 rante d'un tel dépôt, et si on en étale une petite quantité entre 

 deux lames de verre sous le microscope, on voit toutes les 

 amibes, leurs pseudopodes rétractés et pressées les unes contre 

 les autres, devenues polygonales par pression réciproque et 

 offrant alors un aspect analogue à celui d'un parencliyme 

 végétal. On reconnaît cependant très bien dans ciiacune d'elles 

 le noyau, les vacuoles digestives et la vacuole pulsat^le. C'est de 

 ce dépôt que nous allons nous servir pour lapréparation de la dias 

 tase. La quantité naturellement variable de dépôt que l'on obtient 

 peut être évaluée en moyenne à 1/4 de c. c. par boîte. 11 faut 

 d'ailleurs employer souvent d'assez grandes quantités de culture 

 pour avoir de la diastase en quantité appréciable, et certaines 

 expériences rapportées ci-dessous ont exigé l'emploi de 20 boîtes 

 à elles seules. 



B. Préparation de l'extrait glycérine. — La centrifugation 

 terminée, le dépôt doit être traité immédiatement. On décante lo 

 liquide et on y ajoute quelques (2 à 3j c. c. de glycérine pour 1 c. c. 

 d'amibes. On a soin de bien délayer de façon que la glycérine 

 pénètre bien dans tous les amas. Si l'on regarde au microscope 

 une goutte de ce liquide très trouble, on y voit flotter quantité 

 d'amibes fortement ratatinées par la forte plasmolyse qu'a déter- 

 minée l'action du réactif. On peut en débarrasser dès lors la 

 glycérine par une centrifugation. Le liquide glycérique contient 

 dès ce moment la diastase protéolytique dont nous devons main- 

 tenant étudier les propriétés. On ne se débarrasse pas toujours 

 à ce moment des corps d'amibes, mais souvent seulement quand 

 on dissout plus tard la diastase dans l'eau. L'extrait glycérine 

 peut être conservé quelque temps à la glacière. Il vaut mieux 

 néanmoins en faire usage le plus rapidement possible. 



C. Préparation du liquide diastasique. — Four obtenir une 

 solution aqueuse active à partir de l'extrait glycérine précédent, 

 on ajoute à 10 c. c. de cet extrait environ oO c. c. d'alcool 

 à 90'^. Il se fait presque aussitôt un abondant précipité flocon- 

 neux que 10 minutes de centrifugation précipitent en une masse 



