868 ANiNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



les anaérobies. Cette méthode commence à être connue et nous 

 n'avons pas à la décrire ici. Ce qu'il ost important de répéter, 

 c'est qu'il est impossible, au moyen des autres méthodes em- 

 ployées dans les laboratoires, d'obtenir un résultat comparable. 

 Nous avons été amenés, cependant, à y ajouter une légère 

 complication. 



Dans une putréfaction, en etTet, surtout à son début, la 

 quantité des espèces aérobies, ou facultatives, est telle qu'elle 

 empêche l'apparition des anaérobies, soit en modifiant la réaction 

 du milieu, soit en le disloquant. Pour obvier à cet inconvénient, 

 nous nous sommes inspirés de la méthode employée par Rist 

 dans son étude du Leben pour éliminer les aérobies stricts. Cet 

 auteur, avant de faire ses ens«^mencements en tubes profonds, 

 faisait des cultures en bouillon privé d'air. Il obtenait ainsi, après 

 un certain nombre de passages, les espèces facultatives seules. 

 Nous procédons d'une façon analogue. Avant de faire nos répar- 

 titions, dans les tubes de gélose sucrée, en profondeur, nous 

 faisons d'abord des cultures sur gélose couchée, afin d'obtenir 

 les aérobies et les espèces facultatives, puis nous ensemençons 

 un ou deux tubes de bouillon ordinaire, que l'on ferme à la 

 lampe, après y avoir fait le vide. Ces tubes ne sont ouverts 

 qu'au bout de 8 jours. Nous avons pu nous rendre compte ainsi, 

 que si les facultatifs n ont pas absolument disparu, leur vitalité 

 et leur nombre diminuent; par contre, les anaérobies se multi- 

 plient et il est facile de les isoler d'après la méthode de Viiillon. 

 Si après ce temps, il existe encore trop de facultatifs, on peut 

 faire une série de passages en bouillon privé d'air. 



Cette modification nous a permis d'avoir d'excellents résul- 

 tats. 



Les espèces une fois isolées, nous étudions leurs caractères 

 morphologiques, chimiques et biologiques. 



(A) ÉTUDE DES CARACTÈRES MORPHOLOOIQUES. 



Nous avons suivi, pour cette étude, les procédés en usage 

 dans tous les laboratoires. — Examen microscopique, étude 

 de la mobilité, réaction chromophile, forme des cultures, leurs 

 caractères sur les milieux liquides, bouillons simples, peptonisés, 

 sucrés, lait, gélatine, gélose couchée ou profonde, etc. Ce n'est 

 que lorsque toutes les espèces étaient ainsi caractérisées que 



