CONTRIBUTION A LÉTUDE DU TÉTANOS. 15 



oblient dans un bouillon de bœuf ou de poule préparé avec uue 

 partie de viande et deux parties d'eau. Dans le sang- en nature 

 et le sérum frais, après une végétation maigre et en apparence 

 difficile, le microbe produit un poison d'une activité considé- 

 rable. 



Oïl peut, par un artifice, augmenter d'une manière remar- 

 quable la toxicité des cultures en bouillon; il suffit d'utiliser 

 ce fait que le microbe se développe facilement dans un milieu 

 où une première génération a déjà vécu et élaboré son 

 poison. Une culture en bouillon de bœuf peptonisé et glycosé 

 à i 0/0, datant de 20 jours, donne, après filtration, un liquide 

 (jui tue le cobaye à la dose minima de 1/l.jO de centimètre 

 cube. L'ensemencement de bacilles jeunes dans ce liquide est 

 suivi d'une culture très abondante: filtrée au 18'" jour, elle tue 

 le cobaye au 1/500 de centimètre cube. Dans le liquide ainsi 

 obtenu, il n'existe plus de substances nutritives pour un nou- 

 veau développement du microbe, car l'ensemencemeiil reste 

 infécond; mais si on y ajoute une faible quantité de bouillon 

 neuf (20 " pour 3.j0 ^"^ de la culture ancienne), la troisième 

 vé^.étation est encore assez abondante. Les microbes toutefois 

 sont restés en grande partie filamenteux ou présentent des 

 formes d'involution : les spores sont rares. Cette culture filtrée 

 au 16« jour donne un liquide qui tue le cobaye au millième 

 de centimètre cube (peut-être même à dose moindre; et la souris 

 au cent millième de centimètre cube. 



La quantité de toxine contenue dans une si minime fraction 

 du liquide filtré est difficile à apprécier; peut-être cependant les 

 cbiffres suivants en donneront-ils une idée approximative. Un 

 centimètre cube de ce liquide si actif, évaporé dans le vide, 

 donne un résidu sec de 0^'',040. Soumis àla calcination, ce résidu 

 subit une perte de 0'^'",02.j représentant le poids de la matière 

 organique. Si l'on admet, chose évidemment inexacte, que ces 

 2o milligrammes appartiennent intégralement à la toxine elle- 

 même, il ressort que ce poids de matière organique permettrait 

 de tuer mille cobayes au moins ou cent mille souris; la dose 

 mortelle serait donc, pour un cobaye, de 0^'", 000, 025, et pour 

 une souris de 0s'",000,000,25 ! Est-il besoin de dire que dans 

 ces 25 milligrammes de matière organique entrent pour une très 

 large part des substances étrangères au poison tétanique, et 



