ORGAMSiMi:s 1)K LA NITIUFICATION. 93 



J'ai sJo-nalé ce résultat, en m'abstenant de recommander la 

 méthode comme étant toujours d'une application sure. Elle 

 devait encore faire ses preuves. 



Depuis, j'ai eu maintes fois l'occasion d'entreprendre la sépa- 

 ration des nitrobactéries de diverses terres, et j'ai été amené par 

 des échecs à reconnaître que cette méthode ne suftit pas dans la 

 majorité des cas. En voici la raison. Il est très facile d'éliminer 

 par ce procédé tous les organismes qui croissent rapidement sur 

 la gélatine, et dont les colonies se montrent au 2" ou Séjour. J'y 

 ai réussi presque toujours d'un coup. Mais il n'en est pas ainsi 

 avec d'autres espèces à végétation pénible sur le même milieu, 

 et qui sont souvent présentes dans le sol ; j'ai eu l'occasion de 

 m'en assurer. Leurs colonies n'apparaissent que du 8" au 10' jour, 

 et elles restent longtemps très petites. 11 arrive ainsi, par exemple, 

 qu'on pique la gélatine à un endroit complètement exempt de 

 colonies, et qu'en examinant ensuite la piqûre et ses alentours 

 on les trouve remplis de très petites colonies. Il n'est guère dou- 

 teux alors que la semence puisée n'a pas été pure. On n'a aucune 

 chance de remédier à cet inconvénient, en reculant le moment de 

 la prise de semence, car au bout de dix jours environ la surface 

 de la gélatine n'en fournit plus d'efficace. En somme, il faut le 

 concours d'un heureux hasard, j'entends l'absence de ces mi- 

 crobes à végétation lente, pour réussir à isoler complètement une 

 nitrobactérie par ce procédé. Il permet pourtant de pousser très 

 loin, en peu de temps, la purification d'une culture impure. 



Par malheur, il y a encore à compter, dans cette question de 

 la séparation des nitrobactéries, avec une difficulté autrement 

 sérieuse. Quelles g-aranties de la pureté d'une culture de ces 

 organismes faut-il exiger? Autrefois on considérait un liquide 

 comme stérile, s'il ne donnait pas de végétation sur la gélatine ; 

 l'ensemencement sur ce milieu était tenu pour le mode de con- 

 trôle le plus décisif. Il a été démontré maintenant qu'un liquide 

 peut contenir des quantités énormes de nitrobactéries et laisser 

 les g-élatines stériles. Mais pour les autres qui l'accompagnent 

 comme impuretés, on était autorisé, d'après les opinions cou- 

 rantes, à considérer toujours l'épreuve de la gélatine comme 

 valable. Le phénomène de nitrificatiou et la stérilité sur la 

 gélatine nutritive sont devenus ainsi tout naturellement les 

 caractères d'une culture pure de nitrobactéries. Indépendamment 



