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11 existe encore une méthode générale pour la séparation 

 ik'S microbes qui s'imposait dans ce cas, où la gélatine refusait 

 le service. C'est la méthode dite de dilution. Aussi n'a-t-on pas 

 manqué de l'essayer. C'est M. Percy Frankland et M°"^ Fran- 

 kland ' qui s'en sont servi avec le plus de persévérance et le 

 plus de résultat. Leurs cjcprriences de dilution ont demandé deux 

 ans, et ce n'est qu'au bout de ce temps qu'une seule culture de 

 leurs longues séries s'est montrée comme « pure », c'est-à-dire 

 qu'elle nitrifiait, laissait la gélatine au bouillon-peptone stérile, 

 et, je le suppose, se montrait au microscope comme sensible- 

 ment homogène. 



M. Warington ^ a aussi employé cette méthode sans pouvoir 

 épurer ses cultures à ce point. Moi, je l'ai essayée pendant 

 l'hiver de 1889-90. J'ai fait trois séries d'expériences (en tout 

 50 ensemencements) qui ont complètement manqué leur but. 

 Ou il n'y avait aucune nitrification, ou les cultures nitrifiaient, 

 mais leur impureté n'était rien moins que douteuse. J'ai bientôt 

 définitivement abandonné la méthode, comme ne valant rien 

 dans ce cas, et je persiste dans mon opinion. Elle prend énormé- 

 ment de temps et le hasard, qui y est tout, n'aide que trop mal 

 nos elTorts. Rendant tout hommage à la patience des auteurs 

 cités, je ne crois pas que leur exemple inspire à quelqu'un, qui 

 voudrait isoler le ferment nitrique de quelque terre, le désir de 

 le faire par dilution ^ 



On comprendra, après ce qui a été dit, que la nécessité de 

 chercher une méthode plus sûre s'imposait. Recourir aux 

 milieux gélatinisants, et en chercher un qui soit apte à nourrir 

 ces organismes, était évidemment le chemin qui promettait le 

 plus. Ce milieu trouvé et ceux-ci y formant des colonies facile- 

 ment reconnaissables, le problème aurait fait un grand pas vers 

 sa solution, à une condition pourtant de plus, c'est que ce milieu 

 soit en même temps absolument défavorable aux autres 

 microbes; autrement, à cause de la lenteur extraordinaire de 

 l'accroissement des nitrobactéries^ il serait, dans la plupart des 

 cas, envahi et altéré avant que celles-ci eussent le temps 

 d'atteindre un certain degré de développement. 



1 . Loc. cil. 



2. Chcm. Xcws, vol. LXI, n" 1S62. 



3. L'histoire morphologique de ces organismes nous expliquera pounjuoi celte 

 méthode aussi refuse le service. 



