288 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



I. — SÉPARATION ET PURIFICATION DU BACILLE 



Un milieu nutritif stérilisé, ensemencé avec quelques gouttes 

 d'eau des conduites de Paris*, se peuple rapidement d'une foule 

 de microbes divers, microcoques, bâtonnets, etc. Au bout de 

 quelques jours, les aérobies ont absorbé tout l'oxygène du 

 liquide et empêchent l'accès de l'air ; les anaérobies commencent 

 alors à pulluler et à produire des fermentations, avec dégage- 

 ment de gaz. 



Pour obtenir le bacille cherché, je me sers de la pomme de 

 terre comme milieu de culture, et je fais le vide dans les vases 

 employés, afin d'éliminer dès l'origine les microbes uniquement 

 aérobies. 



Dans des tubes à essai ordinaires, mais à parois assez 

 résistantes, j'introduis de petits morceaux de pommes de terre 

 jusqu'à la hauteur de 2 à 3 centimètres, et j'ajoute une quantité 

 d'eau suffisante pour les recouvrir. Après avoir fermé l'extrémité 

 par un tampon de coton, je stérilise le tout à l'autoclave à 115°. 



Lorsque ces tubes sont refroidis, j'y sème quelques gouttes 

 d'eau des conduites de Paris, ou mieux un peu du dépôt laissé 

 par ces eaux sur une bougie Chamberland ayant servi à la 

 filtration pendant plusieurs jours. Chacun d'eux est ensuite 

 étiré au chalumeau dans sa partie centrale ; après avoir enfoncé 

 le coton et étiré une seconde fois au-dessus, je fais le vide avec 

 la pompe à mercure. Je ferme ensuite à la lampe la partie 

 étranglée et je place ces tubes à l'étuve. 



Le lendemain de l'ensemencement, de nombreux microbes 

 se sont déjà développés ; mais, si l'on attend quelques jours, on 

 constate un fort dégagement de gaz, et la pression dans l'inté- 

 rieur du tube devient considérable. 



J'introduis par aspiration dans une effilure stérilisée quel- 

 ques gouttes d'une culture de huit à dix jours environ, et je les 

 maintiens ensuite pendant 10 minutes à TS^-SO". Le liquide ainsi 

 chaufTé est ensemencé dans des tubes à pommes de terre, où le 

 bacille se développe à nouveau. 



4. Les expériences ont. ('■té faites : 1° avec l'eau de Seine prise au Inboraloire 

 de l'Ecole normale supérieure; 2" avec l'eau de Vanne, prise aux ruijinets de 

 l'Institut Pasteur, rue Du tôt, 25. 



