98 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Les sulfates avec le chlorure d'un côlé. le phosphate et car- 

 bonate d'un autre sont dissous séparément et les deux solutions 

 stérilisées à part; on les mélange après refroidissement. 



Pour les cultures, je me servais des boîtes en verre bien 

 connues que je choisissais petites (5 c. de diamètre) et de verre 

 mince. L'arrangement des cultures se fait comme il suit : 



On commence par concentrer la solution silicique en l'éva- 

 porant dans un petit ballon, jusqu'à ce qu'elle soit réduite à la 

 moitié de son volume. Avant que le liquide ait atteint ce degré 

 de concentration, on ralentit l'évaporation et on fait quelques 

 essais successifs de son pouvoir gélatinisant. Pour cela, on 

 prend sur un verre de montre 2 ou 3 gouttes du liquide et on 

 y ajoute une goutte de solution saline : la tendance à gélatiniser 

 doit se manifester au bout de 5 minutes ; au bout de 10 à lo, la 

 gelée doit être si plastique qu'une empreinte faite sur sa surface 

 ne s'efface plus. Aussitôt ce degré atteint, il n'est pas bon de 

 pousser la coacentration plus loin, car alors la gelée ne sera pas 

 pure, mais remplie de grains et d'écaillés d'acide silicique inso- 

 luble. On distribue ensuite la solution silicique au moyen d'une 

 mince pipette dans les boites et on la gélatinise, en y faisant 

 couler la solution de sel; selon le degré de solidité qu'on veut 

 atteindre, on en prend la moitié ou le tiers du volume de la 

 solution silicique, et on n'oublie pas de bien mélanger les deux 

 liquides. Au bout de quelques minutes une faible opalescence 

 dénote la gélification. 



Si on veut répartir la semence dans la plaque, on a le temps 

 de le faire immédiatement après avoir mélangé les deux liquides. 

 Pour ensemencer par stries, on attend que la coagulation soit 

 complète, soit quinze minutes. 



Quelquefois je remplaçais, dans ma solution de sels, le car- 

 bonate alcalin, dont l'emploi présente quelque inconvénient, par 

 le carbonate de magnésie. La limpidité de la gelée est alors 

 naturellement perdue et sa transparence diminuée, mais cela 

 ne gêne que peul'observation; c'est qu'au tour des colonies vigou- 

 reuses les grumeaux du sel sont dissous, et elles apparaissent 

 alors entourées d'une zone limpide. Loin de cacher les colonies, 

 la présence du carbonate insoluble attire l'attention sur elles et 

 rend visible leur action caractéristique. 



Quant aux végétations que forment les nitrorganismes sur 



