126 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Sur les racines des pois cultivés dans les solutions nutritives, 

 j'ai coupé quelques fragments pourvus de nodosités pas trop 

 avancées, mais contenant déjà des bactéroïdes. Je les ai plong-és 

 dans une solution de sublimé à 1 %o, et, après dix minutes, 

 lavées à trois reprises avec de l'eau stérilisée à 120^^. Les 

 fragments de racines avec leurs tubercules ont ensuite été broyés 

 avec un agitateur préalablement ilambé; quelques gouttes du 

 mélange aspirées avec un tube capillaire ont été introduites 

 dans les milieux de culture. 



Ce procédé m'a paru meilleur que celui que j'avais suivi 

 d'abord, et qui consistait à percer les nodosités stérilisées avec 

 un tube capillaire; souvent, des microbes étrangers pénètrent 

 dans les cultures pendant les manipulations. Un avantage plus 

 important encore, c'est que le broyage permet de mélanger les 

 bactéroïdes d'âges différents, et dont l'aptitude au développement 

 est fort inégale. 



Quant au milieu de culture, je me servais de prime abord de 

 bouillon de pois gélatinisé et additionné d'asparag'ine, d'après 

 les indications de M. Beyerinck. Mais cette substance amidée 

 ne s'est pas montrée bien nécessaire, ni même avantageuse 

 dans des cultures comparatives. 



Sur bouillon de pois gélatinisé, le développement des colonies 

 est assez inégal. On voit côte à côte, et à la surface de la géla- 

 tine nutritive, des colonies très petites formées de cellules peu 

 nombreuses, tandis que d'autres atteignent un diamètre de près 

 d'un millimètre. Cette dilférence tient sans aucun doute à l'état 

 physiologique des bactéroïdes au moment de l'ensemencement. 

 Les plus petites colonies sont arrondies, les plus grandes m'ont 

 présenté plusieurs fois des contours sinueux qui rappellent les 

 colonies de la forme-levure de Claclosporium, que j'ai fig^urées 

 naguère dans ces Annales (t. Il, p. o84. Voir pi. 11, fig-. 12). 



Ces formes de développement sont très rares; je me suis 

 assuré qu'elles étaient bien dues au Illiizobium, par le procédé 

 des inoculations au Pois, et en y constatant la présence des 

 formes ramifiées des bactéroïdes. 



M. Prazmowski indique une membrane très mince qui 

 enveloppe les jeunes colonies. Au moment de mes recherches) 

 mon attention n'a pas été attirée sur ce point. Ce qui m'a frappé, 

 c'est l'extrême viscosité des colonies les plus vigoureuses. Elle 



