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ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



nie sur pomme de terre, j'ensemence un tube en profondeur, et, 

 quand le développement est commencé, j'introduis une goutte 

 de cette nouvelle culture dans quelques centimètres cubes d'eau 

 stérilisée. 



On ne peut songer à opérer à l'aide de plaques, le bacille 

 cherché étant anaérobie. J'ai employé le procédé suivant : 



Un tube de gélatine est liquéfié par la chaleur ; il est main- 

 tenu dans un bain-marie à la température de 30 à 33°, et ense- 

 mencé avec quelques gouttes de la dilution précédente. 



J'y fais passer avec pureté un courant d'hydrogène pendant 

 deux à trois heures environ, afin d'enlever par diffusion l'air 

 contenu dans le milieu gélatine. 



J'emploie alors des tubes de verre effilés, fermés par un 

 tampon de coton ; ils ne diffèrent de ceux qui servent ordinai- 

 rement dans les laboratoires que par Feffilure, dont la longueur 

 est de 15 centimètres et le diamètre d'un millimètre environ. 

 Par aspiration, et sans arrêter le courant d'bydrog^ène, je les 

 remplis de gélatine ensemencée, et je les ferme aussitôt à la 

 lampe à l'extrémité inférieure et à la partie supérieure, de façon 

 à emprisonner complètement le milieu nutritif. 



Ces tubes sont maintenus verticalement pendant quelques 

 instants, afin de permettre aux petites bulles d'hydrogène qu'ils 

 contiennent de se rassembler à la partie supérieure. Puis, quand 

 la masse est devenue bien homogène, je les place horizontale- 

 ment et je laisse la solidification s'effectuer. 



Ce procédé simple et rapide peut servir à la séparation des 

 microbes anaérobies qui donnent des colonies dans la gélatine. 

 Il se rapproche beaucoup de ceux qui ont été indiqués par 

 M. Salomonsen' et par M. Vignal-. 



Au bout de cinq à six jours, on aperçoit, en certains points 

 des tubes effilés, de petites taches blanches, distinctes, donnant 

 lieu à un dégagement de gaz : autour de chacune d'elles appa- 

 raissent des bulles qui disloquent la masse sans la liquéfier. 



J'ai toujours choisi les tubes qui ne renfermaient qu'une 

 colonie pour prendre la semence pure de mon bacille, que jap- 

 pellerai bacille amijlozijme. à cause de la propriété qu'il pos- 

 sède de faire fermenter l'amidon. 



i. .1. Salomonsen, TechnUjue élémentaire de bactériolo(iie. 



"2. W. ViGNAL, Annales de iinslitut Pasleur, louie I, lt)87, page 338. 



