TOXINE DIPHTERIQUE SANS VIANDE. 703 



on verse la décoction dans un ou plusieurs vases cylindriques et 

 on laisse reposer pendant 24 heures. 



La levure se sépare, laissant au-dessus d'elle un liquide louche 

 qu'on décante. A ce liquide légèrement acidulé on ajoute par litre 

 S grammes de sel marin et 20 grammes de peptone Witte de 

 Rostock ; on neutralise avec de la soude, et on ajoute encore par 

 litre 7 c. c. d'une solution de soude normale. On chauffe ensuite, 

 on fdtre sur papier, répartit dans les matras et stérilise à 120". 

 Pour être sûr du résultat, il est important de ne se servir 

 que d'une peptone de Witte provenant directement de la fabrique 

 de Rostock, car il existe dans le commerce des peptones dites 

 Witte qui ne proviennent pas de cette fabrique et donnent des 

 résultats très variables. 



Si la levure est additionnée de fécule, on a beaucoup de dif- 

 ficulté pour obtenir un liquide de culture limpide. De préférence 

 je me suis servi d'une levure, dite Koningsgist, de la fabrique de 

 M. van Marken à Delft. Mais bientôt cependant j'observai qu'il 

 est absolument superflu de filtrer sur papier. L'emploi d'un 

 liquide louche ne nuit pas à la production de la toxine, et les 

 cultures filtrées sur papier donnent un liquide limpide. 



Le milieu de culture, composé comme je viens de l'indiquer, 

 m'a fourni régulièrement des toxines plus actives que le bouillon 

 préparé avec de la vieille viande. Le même bacille diphtérique, 

 dont je me sers depuis des années, m'a donné des toxines 20 fois 

 plus fortes, depuis que j'ai remplacé le bouillon par la décoction 

 de levure. Les cultures placées à l'étuve à 35° poussent très 

 bien en voile et restent constamment alcalines. 



Je conserve mon bacille toxigène sur du sérum solidifié de 

 Loeffler ; après 24 heures de culture à 35°, les tubes sont re- 

 tirés de l'étuve et gardés à l'abri de la lumière. Chaque fois 

 que je désire préparer de la toxine, je rajeunis d'abord la cul- 

 ture. A cet effet, j'ensemence d'abord sur du sérum coagulé; 

 c'est de cette nouvelle génération que je transporte une anse de 

 platine dans un tube à essai contenant 10 c. c. environ de la 

 décoction de levure peptonisée, et je cultive de nouveau à 35° en 

 inclinant fortement le tube. Après 24 heures la surface du 

 liquide est couverte d'un voile épais, dont je me sers pour 

 l'ensemencement d'une quantité de matras, en déposant à la 

 surface du liquide, disposé en couche d'une épaisseur de 



