PRODUCTION DE LA TOXINE DIPHTÉRIQUE-. 35 



viande faite à la température de 3"j° s'est toujours montrée supé- 

 rieure aux autres milieux ; depuis que nous employons ce 

 procédé., jamais nous n'avons eu d'acidité dans les cultures. 

 Toujours le développement du bacille a été abondant et la pro- 

 duction de la toxine rapide et régulière. 



Voici la technique que nous conseillons de suivre : hacher 

 de la viande de veau, mettre 500 grammes de ce hachis par litre 

 d'eau et placer le tout à l'étuve à 35° pendant 20 heures ; expri- 

 mer la viande et, au liquide recueilli, ajouter 5 grammes de sel 

 marin par litre, peptoniser, alcaliniser et stériliser. 



Nous avons déjà dit quel était le meilleur moyen pour alcali- 

 niser le bouillon, voyons quelle peptone il faut ajouter. 



Peptonisation. — Je n'apprendrai rien à personne en disant 

 que les peptones sortant d'une même fabrique ont rarement la 

 même composition ; j'ai utilisé les échantillons les plus variés. 

 De tous ces essais, je pourrais conclure qu'il y a des peptones 

 commerciales qui donnent le plus souvent de fortes toxines; 

 mais de temps en temps, même pour les marques les meilleures, 

 on trouve des échantillons qui ne fournissent plus d'aussi bons 

 résultats : aussi vaut-il mieux préparer soi-même la solution de 

 peptone. 



Voici comment je procède : 



Je prends 1 litre de macération de viande de veau fermentée 

 à 35° et j'ajoute S grammes de sel marin. 



A cette macération de viande, je mélange 1 litre de la solution 

 de peptone déjà alcalinisée, filtrée et préparée comme il a été dit 

 plus haut avec les estomacs de porcs. 



Quand on a mélangé par parties égales la macération de 

 viande à 35° et le bouillon de panse de porc, on chauffe le mélange 

 à 70° jusqu'à coagulation des matières albuminoïdes, on filtre 

 sur papier, on alcalinise et on stérilise. 



Stérilisation. — Dans tous nos essais, nous avons vu qu'on 

 obtient un très bon milieu en chauffant ce mélange à 70°, en 

 l'alcalinisant comme l'indiquent Park et Williams, et en le stéri- 

 lisant par filtration sur bougie Ghamberland. 



Jusqu'ici c'est le milieu qui nous a paru le plus satisfaisant. 



C'est avec ce milieu que nous avons obtenu dos toxines 

 tuant au 1/500, soit à c. c. 002, les cobayes de 500 grammes. 



C'est dans ce milieu que nous ensemençons les microbes 



