134 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



20 e jour. A partir de ce moment il est devenu visqueux ; ce chan- 

 gement dans l'aspect de la culture a coïncidé avec l'évolution 

 de la forme ronde vers la forme bacillaire. Lorsqu'on a mis fin- 

 à cette expérience, les tubes de gélose ensemencés avec le con- 

 tenu du ballon montraient au microscope deux bacilles mobiles, 

 légèrement différenciés; incapables de produire de la mucosité 

 lorsqu'ils sont séparés, ils en élaborent lorsqu'ils sont associés. 

 De plus, ces microbes ne provoquent plus de déperdition d'azote. 

 Cette évolution vers la forme bacillaire active s'est faite sous 

 l'influence d'une température favorable et d'une aération très 

 active, car pendant ce temps, les formes conservées sur gélose 

 ne se sont pas transformées. Il faut noter également l'influence 

 de la composition du milieu de culture, très pauvre en azote com- 

 biné et très riche en saccharose. 



Les chiffres relatifs au gain d'azote correspondent assez 

 exactement, dans les deux autres cultures, aux propriétés des 

 microbes qu'elles renferment. Le n° 2 a consommé plus de sac- 

 charose pour produire à peu près le même travail, l'association 

 de deux formes exerce donc encore une influence sensible sur le 

 résultat final. 



A ces deux séries d'expériences correspondent deux séries 

 d'inoculations faites sur des vesces de Na7'bonne '; les résultats 

 obtenus dans cette voie reproduisent assez fidèlement ceux que 

 l'analyse vient de fournir. 



1. Cette légumineuse donne des nodosités 9 à 12 jours après l'inoculation. La 

 graine est de la grosseur du pois le plus volumineux. Le testa, plus dur, permet 

 de faire agir plus longtemps le sublimé et d"obtenir une stérilisation plus rigou- 

 reuse sans s'exposer à endommager l'embryon. 



Cqmme mes recherches ont nécessité l'emploi d'un grand nombre de plantes 

 poussant dans des solutions nutritives stériles, je donnerai ici le mode opéra- 

 toire auquel je me suis arrêté. 



Pour la stérilisation, j'ai eu recours au procédé ordinaire qui consiste: l°en 

 lavages préalables à l'eau stérile; 2° séjour d'un quart d'heure dans le sublimé 

 acide au 1/100, en récipient stérile; 3° 4 à 5 lavages à l'eau stérile en ballons sté- 

 riles. 



Les semences ainsi préparées sont réparties dans des tubes de 20 centimètres 

 de longueur sur 2 de diamètre et remplis au 4/3 de leur hauteur d'eau distillée: 

 ces tubes sont munis de deux tampons de coton; l'un, assez lâche, repose sur l'eau 

 dans laquelle il est immergé en partie; l'autre, plus serré, remplit le rôle ordi- 

 naire des tampons de coton. Le tube ainsi préparé est stérilisé à 120°; pour met- 

 tre la graine en germination, an la dépose avec une pince tlambée sur le tampon 

 de coton intérieur. 



Au bout de 48 heures à la température de la chambre, en été, la racine sort ; 

 elle traverse facilement le tampon de coton et va baigner dans l'eau distillée, 

 pendant que la tige occupe le compartiment supérieur du tube; celle-ci peut 



