436 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



INJECTION DES SPORES DANS LE TISSU SOUS-CUTANE 



Pour étudier les modifications que peuvent subir les spores' 

 mises directement dans le corps animal, nous avons injecté un 

 mélange riche en spores (en solution physiologique) dans le 

 tissu sous-cutané, dans la chambre antérieure de l'œil et dans 

 la cavité péritonéale. Nous avons injecté 1 à 1,5 c. c. du 

 mélange (200,000 à 300,000 spores) sous la peau du ventre des 

 lapins. 



Le lendemain, la peau, au lieu d'injection, était un peu rouge 

 et cedématiée; ces phénomènes locaux persistaient pendant 3 à 

 S jours. Nous retirions l'exsudat formé dans le tissu sous-cutané 

 au bout de 24, 48 et 72 heures, avec une pipette stérilisée, après 

 avoir brûlé préalablement la peau avec un fer rouge, et nous 

 faisions une goutte pendante des préparations colorées (fuchsine 

 et bleu de méthylène), et enfin nous prélevions une goutte pour 

 l'ensemencer sur gélose, pour nous assurer de la vitalité des 

 microbes retirés de l'exsudat. 



Au début, nous n'avons réussi à colorer les spores, dans 

 les frottis provenant de l'exsudat, qu'en employant le procédé 

 de Mciller modifié. Après la fixation de la préparation sur la 

 flamme d'un bec de gaz, elle était traitée pendant 10 à 12 minutes 

 par l'acide chromique à 5 0/0, puis lavée à l'eau ; la lamelle 

 était ensuite mise dans la solution de fuchsine deZiehl, chauffée 

 jusqu'à l'ébullition 15 à 20 minutes, puis décolorée pendant 

 quelques secondes dans le chlorhydrate d'aniline à 2 0/0, lavée 

 à l'alcool, à l'eau, puis colorée par le bleu de méthylène. La 

 préparation séchée était enfin incluse dans le baume de Canada. 

 Ce procédé donnait une coloration très belle et très nette : les 

 spores étaient colorées en rouge et les noyaux des leucocytes 

 en bleu. 



En outre, nous avons essayé à plusieurs reprises le nouveau 

 procédé de coloration des spores proposé récemment par 

 M. Aladar Aueszky (Gentralbl. f. Bacteriol., n° 8, 1898), qui se sert 

 d'une solution chaude d'acide chlorhydrique à 2 0/0 comme 

 mordant. Ce procédé, en dehors d'une petite économie de temps, 

 ne présente pas d'autres avantages et nous l'avons abandonné. 



En examinant l'exsudat sur des préparations colorées, nous 



