702 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



Enfin, M. Thorvald Madsen 2 a obtenu des résultats très irré- 

 guliers, tant avec des viandes fraîches qu'avec des viandes con- 

 servées pendant plusieurs jours. 



Je n'ai jamais rencontré de difficultés en me servant d'une 

 viande ancienne, dégageant une légère odeur. Il faut remar- 

 quer que depuis 1894 je travaille avec le même bacille diphté- 

 rique, bien habitué à vivre en dehors de l'organisme, donnant 

 une abondante culture dès les premières 24 heures, et formant 

 à la surface un voile très épais ; les cultures étaient dans un 

 parfait repos, n'étaient jamais transportées ou secouées. 



Mais le point le plus difficile, c'est sans doute de fixer le 

 point auquel il faut arrêter la putréfaction de la viande, et 

 c'est à juste titre que M. Martin objecte que je n'avais pas donné 

 de règles fixes, que j'avais simplement indiqué que cette putré- 

 faction devait détruire les sucres de la viande. 



C'est pourquoi M. Martin a modifié et simplifié mon procédé. 

 Sur le conseil de M. Roux, il ajouta tout d'abord de la levure à 

 la macération de viande et porta le tout à l'étuve à 35°. Mais 

 on trouva qu'il suffit de placer la macération de viande pendant 

 20 heures à 35" pour obtenir un bouillon qui, ensemencé avec le 

 bacille diphtérique, ne donne jamais d'acide. 



Tout comme MM. Roux et Martin, j'ai essayé de différents 

 moyens pour simplifier mon procédé. J'ajoutai entre autres à la 

 macération de viande fraîche de la levure de commerce, et j'étu- 

 diai l'effet de la fermentation à différentes températures. En 

 faisant ces expériences, j'ai été bien surpris de constater que la 

 levure est capable de favoriser la production de la toxine, même 

 si l'addition de la levure à la macération n'a lieu qu'au moment 

 de la cuisson, de sorte que toute fermentation était exclue. 



Il semblait donc intéressant de rechercher si une simple 

 décoction de levure se prêterait à la production de la toxine. 



Les résultats de ces essais ont dépassé mon attente. 



Après quelques expériences comparatives, je me suis arrêté à 

 la méthode suivante qui, depuis plusieurs mois déjà, m'a donné 

 régulièrement d'excellents résultats. 



Je me sers de levure de commerce, non de levure de brasse- 

 rie. Un kilo est délayé dans 5 litres d'eau et on fait bouillir pen- 

 dant 20 minutes en agitant constamment avec une spatule. Puis 



1. Zur Biologie des Diphteriebacillus, Zeitscltrifl fur Hygiène u. Infections' 

 krankheiten. Bd. 26, 4897, p. 157. 



