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tuberi ammalati. Nel 1* caso il liquido culturale aveva la seguente 

 composizione : 



Urea p. 10 



Glucosio » 10 



Fosfato potassico » 5 



Acqua comune » 1000 



Questo liquido veniva distribuito in Erlenmeyer di circa 500 ce. 

 di capacità, sterilizzato e poi inoculato, mantenendo in termostato 

 a 28°. Quando il massimo sviluppo era raggiunto (dopo circa 4 giorni 

 per il Bacillus, dopo 6 per lo Pseudomonas), si aggiungeva per ogni 

 100 ce. di liquido, 1 ce. di soluzione alcoolica satura di timolo. 

 Dopo poche ore si depositava al fondo dei recipienti un leggero 

 precipitato, mentre il liquido diventava perfettamente limpido. La 

 reazione era per lo più debolmente acida, specialmente nel liquido 

 di coltura del Bacillus Ixiae. 



Nel 2^ caso, quando cioè il liquido enzimatico era formato dal 

 succo di tuberi marciti, i microrganismi si inoculavano dapprima su 

 fette di tuberi sani, precedentemente sterilizzate in autoclave. Si 

 manteneva in incubazione fino a completo rammollimento dei tes- 

 suti, poi le fette venivano ridotte in poltiglia, aggiungendo poca 

 acqua. Il liquido spremuto dalla polpa veniva filtrato per carta, 

 poi addizionato di cloroformio o meglio di timolo, come nel caso 

 precedente. 



Preparati così i liquidi enzimatici, volli innanzi tutto control- 

 larne l'efficacia, ponendo, in una porzione di essi, delle sottili se- 

 zioni di cotiledone di lupino, ed esaminando periodicamente al 

 microscopio. Da queste prove risultò chiaramente che in essi non si 

 aveva nessuna diminuzione del potere citolitico. In principio le la- 

 melle mediane divengono meno rifrangenti, e si rigonfiano notevol- 

 mente: poi cominciano a disciogliersi ed a scomparire nelle porzioni 

 più sottili, mentre resistono alquanto in quelle più ispessite. Ma basta 

 una leggera compressione sul copri-oggetti per provocare la separa- 

 zione completa delle cellule. Di solito occorrono da 1 a 2 giorni, alla 

 temperatura di circa 30°, per ottenere il disgregamento completo 

 delle sezioni. Le pareti cellulari rimangono inalterate, anche dopo 

 una lunga immersione, conservando perfettamente la reazione della 

 cellulosa. Il distacco del protoplasma dalla parete si verifica invece 

 molto presto, specialmente nel liquido enzimatico dello Pseudomonas, 

 dove si osservano fenomeni di degenerazione e di corrosione anche 

 a carico dei granuli di aleurone. 



