﻿o,;-_) Referate. XVI, 2. 



Diese „NEissER'sche" Doppelfärbung beruht darauf, dass durch 

 Vorfärbuiig mit Methylenblau und Nachfärbung mit Vesuvin im 

 Diphtlieriebacillus eigenthiimliche schwarzblaue Körnchen zur An- 

 schauung gebracht werden. Da sich der Leib des Diphtheriebacillus 

 selbst mit Methylenblau gut färbt, setzt Neisser diese Affinität durch 

 Verdünnung und Benutzung sauren Methylenblaus herab (Princip 

 der Anwendung „farbschwacher" Lösungen). 



Neisser's Vorschrift lautet : 



1) 1 g Methylenblaupulver (Grübler, Leipzig) wird gelöst in 

 20 CO 90procentigen Alkohols ; dazu kommen 950 destillirtes Wasser 

 und 50 cc Eisessig. 



2) 2 g Vesuvin, gelöst in ein Liter kochendem destillirten Wasser. 

 Filtriren, besonders der letzteren Lösung, ist nöthig. Das Trockeu- 

 präparat wird 1 bis 3 Secunden mit den „essigsauren Methylenblau" 

 gefärbt, mit Wasser abgespült, 3 bis 5 Secunden mit Bismarckbraun 

 nachgefärbt, abgespült etc. — Neisser hält seine Färbung für ein 

 wesentliches difFerential-diagnostisches Merkmal der Diphtheriebacillen. 

 Nothwendig für die Differentialdiagnose ist aber die Erfüllung fol- 

 gender Bedingungen : 



Es müssen Serumculturen sein auf LöFFLER'schem bei 100^ 

 erstarrten Kinderblutserum [Hammelblutserum ist ebenfalls geeignet. 

 Ref.] Die Culturen müssen mindestens 9 und nicht über 24 Stunden 

 alt sein. (Bei jungen Culturen tritt die Färbung nur vereinzelt, bei 

 alten Culturen zu massig und nicht nur bei Lüffler' sehen Diphtherie- 

 bacillen auf.) Die Temperatur des Brutschrankes soll 36^ nicht 

 übersteigen. 



In richtig ausgeführten und gut gefärbten Präparaten zeigen 

 sich nun 2 bis 3 blaue Körnchen im brauneu Bacillus. Meist liegt 

 an jedem Ende ein Korn , eines wohl auch in der Mitte , seltener 

 nur eines an einem Ende. „Sehr häufig und charakteristisch sind 

 zwei stumpfwinklig an einander liegende Bacillen mit zusammen 3 bis 

 4 Körnchen." 



Als wesentlich zur Differentialdiagnose der Reinculturen empfiehlt 

 Neisser 3) noch Titrirung des Aciditätsgrades der 24- und 48stün- 

 digen Bouilloncultur (in 5 cc bis ca. 35*^ gezüchtet mit Phenol- 

 phthalein und einprocentiger Na OH-Lösimg titrirt). Die Acidität be- 

 trug schon nach einem Tage mindestens 0"07 cc der einprocentigen 

 NaOH-Lösung, meist mehr (durchschnittlich 0'29 cc) , während die 

 wenigen beobachteten säurebildenden Diphtherie - ähnlichen durch- 



