154 Die Untersuchung der Zelle. § 610—612. 



xyphenylalanin (abgekürzt »Dopa«) ein spezifisches intra- 

 zelluläres Oxydationsferment nachweisen, durch das das 

 Dioxyphenylalanin in Melanin übergeführt werden soll. Er 

 betrachtet das D. als Muttersubstanz des Melanins. 



Technik: Man legt lebensfrische Hautstücke in lauwarme 

 Agarlösung, läßt die Substanz durch Erkalten zu einer festen 

 Gallerte erstarren und schneidet mit dem Gefriermikrotom. 

 Die mögHchst dünnen Schnitte kommen bei Zimmertempe- 

 ratur auf 24 Stunden vor Verdunsten geschützt in eine 1 bis 

 2% ige wässerige Lösung von Dioxyphenylalanin. Erfolgt 

 die Reaktion zu schwach, dann färbt man im Brutschrank. 

 Sodann wird in dest. Wasser sorgfältig abgespült, in steigen- 

 dem Alkohol entwässert und durch Xylol in Balsam ein- 

 gebettet. Nachfärbung z. B. mit Methylgrün-Pyronin zu- 

 lässig. Resultat: Das Plasma der Zellen der Epidermis färbt 

 sich diffus oder granulär gelbbraun bis schwarz. In der Kutis 

 färben sich polynukleäre Leukozyten durch die Phenolase. 



610. Nach Kreibich (18) sind ähnhche Erfolge jedoch 

 auch mit Dimethylphenylendiamin zu erhalten. 



611. Nach Matsunaga (18) fällt die Dopareaktion 

 überall positiv aus, wo die Winkler-Schultzesche 

 Reaktion positiv ist (z. B. Granula des myeloiden Sy- 

 stems). M. bringt Gefrierschnitte von frischem oder noch 

 besser von formolfixiertem Material auf 24 Stunden in eine 

 1 — 2% ige Lösung von Dopa wie in § 609. Die Präparate 

 sind gut haltbar. 



612. Unna (15a) nimmt seine Rongalitweißmethode 

 zum Nachweis der Sauerstofforte der Zellen nun folgender- 

 maßen vor: 1. Vorbereitung. Die Gewebe können frisch 

 untersucht werden. Besser wartet man aber die agonalen 

 Schwankungen ab und untersucht die trocken auf Eis ge- 

 legten Stücke erst nach 24 Stunden. In jedem Fall muß 

 das Gewebe unter der Wasserleitung von Blut befreit 

 werden. 2. Schneiden erfolgt auf dem Gefriermikrotom 

 in unfixiertem Zustand. Schnittdicke nicht unter 25 ytt. 

 3. Färbung: Man hält sich 100 ccm einer 0,5%igen Lö- 

 sung von Methylenblau vorrätig, die man mit ca. 7 Tropfen 

 einer 25% igen Salzsäurelösung angesäuert hat. Davon wer- 

 den 10 ccm im Reagierglas mit 0,3 g Rongalit (Badische 

 Anilin- und Sodafabrik oder Heraldit von Casella) bis zur 

 Entfärbung gelinde erwärmt. (Wegen möglicher Zersetzung 

 nicht zu stark erhitzen!) Trübt sich die wasserhelle, mehrere 

 Tage haltbare Lösung, so wird sie filtriert. Man färbt 

 2 Minuten in einem Glasschälchen. Sodann überträgt man 

 die Schnitte einzeln mit Glasnadel unter ständiger Be- 

 wegung, um die Schnitte möglichst rasch und vollständig 



