§ 649 — 651. Nachweis anorganischer Substanzen. 163 



Nach 2 Tagen beginnt an den Kernen Grünfärbung ein- 

 zutreten, die sich allmählich zu Dunkelgrün verstärkt. 



649. Schnitte bringt man auf 1—4 Tage bei 35—40" G 

 in schwefelsauren Alkohol (abs. Alkohol 100,0; Schwefelsäure 

 (spez. Gew. 1,84) 4,0). Vom 2. Tage ab ist der Eisennach- 

 weis möglich. Man wäscht dazu in dest. Wasser ab und 

 bringt den Schnitt in eine frisch bereitete Mischung einer 

 frischen l,5%igen wässerigen Ferrozyankaliumlösung (1 Teil) 

 und einer 0,5%igen Salzsäure (1 Teil). Nach 30 Minuten 

 Waschen in dest. Wasser, abs. Alk., Xylol, Balsam. Eisen 

 blau. Die Resultate dieser Methode sollen aber durch Me- 

 thode § 648 kontrolliert werden. 



Die Sicherheit der in § 648 und § 649 angegebenen Me- 

 thoden wurde mehrfach angezweifelt [vgl. Zacharias (10), 

 Hueck (12), Wiener (16)]. 



b) Nachweis von Kalium. 



650. Macallum benützt dazu die Eigenschaft des 

 Kobaltnitrits mit Kalium einen orangegelben Niederschlag 

 zu geben. Herstellung des Reagens: 20 g Kobaltnitrit und 

 35 g chemisch reines Natriumnitrit werden in 75 com 

 verdünnter Essigsäure (10 ccm Essigsäure auf 65 ccm 

 dest. Wasser) gelöst. Nach einigen Stunden wird filtriert 

 und auf 100 ccm aufgefüllt. Aufbewahren im Eisschrank. 



Nachweis: Gefrierschnitte frischer Organe werden noch 

 in gefrorenem Zustand (um eine Verlagerung des Kaliums 

 durch Diffusion zu verhindern) in das Reagens gebracht. 

 Man schneidet daher mit stark gekühltem Messer (möglichst 

 unter 0°). Nach 1/9 bis mehreren Stunden wird das Reagens 

 abgesaugt und durch eisgekühltes Wasser ersetzt, das nach 

 etwa 3 Minuten erneuert wird. Dies wird in 20 Minuten 

 5 — 6 mal wiederholt. Dann breitet man den Schnitt auf dem 

 Objektträger flach aus. Da die orangerote Färbung in geringen 

 Mengen schwer sichtbar ist, führt man sie in eine schwarze 

 über. Man bedeckt dazu mit einem Tropfen Glyzerin- Ammo- 

 niumsulfid (s. § 648), Spermatozoen oder einzelne Zellen rührt 

 man 30 Minuten mit dem dreifachen Volumen des Reagens 

 an, dann mehrmaliges Auswaschen mit eisgekühltem Wasser 

 (mit Hilfe der Zentrifuge oder auf Filtern mit Saugpumpe), 

 Glyzerin-Ammoniumsulfid usw. 



Auch gegen diese Reaktion Macallums wurden verschiedene 

 Bedenken vorgebracht. (Vgl. Liesegang 14, 469.) 



c) Nachweis von Calcium. 



651. Methode von Grandis und Mainani (00), 

 Ausführung an frischem oder alkoholfixiertem Material, 



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