VOL. 12 (1953) ENZYMIC SYNTHESIS AND BREAKDOWN OF OROTIC ACID I 233 



4. Dihydro-orotic acid was as effective as orotic acid in supporting the growth of Lactobacillus 

 bitlgaricus og, an organism which utihzes orotic acid and ureidosuccinic acid for the synthesis of nucleic 

 acid pyrimidines. 



5. The fusion product of maleic acid and urea, which has the elementary composition of dihydro- 

 orotic acid, was inert with dihydro-orotic dehydrogenase and as a growth factor for L. bulgaricus 09. 

 It was further distinguishable from dihydro-orotic acid of enzymic origin on the basis of ultraviolet 

 spectrum and chemical properties. 



6. The significance of dihydropyrimidines in pyrimidine metabolism is discussed. 



RfiSUMfi 



1. A partir d'extraits d'une bacterie anaerobie du sol, isolee par culture enrichissante sur dc 

 I'acide orotique, un enzyme a ete partiellement purifie. Cet enzyme, appele "dihydro-orotique- 

 deshydrogenase", catalyse la reaction: 



Orotate + DPNH -{- H+ ^ Dihydro-orotate + DPN 



2. Le produit de la reduction enzymatique de I'acide orotique a et6 isole sous forme cristallisee. 

 L'analyse elementaire et le poids equivalent correspondent a I'acide dihydro-orotique. Provisoirement, 

 on considere qu'il s'agit d'acide dihydro-orotique sature en 4-5. 



3. L'equilibre de la reaction est en faveur de la reduction de I'acide orotique; I'oxydation de 

 I'acide dihydro-orotique n'a pu etre demontree qu'a I'aide d'un systeme eliminant le DPNH. 



4. L'acide dihydro-orotique excerce la meme action stimulante que I'acide orotique lui-meme 

 sur la croissance de Lactobacillus bulgaricus 09, organisme qui utilise les acides orotique et ureido- 

 succinique pour synthetiser les pyrimidines d'acides nucleiques. 



5. Le produit de fusion d'acide maleique et d'uree qui a la meme composition elementaire que 

 I'acide dihydro-orotique est inerte vis-a-vis du "dihydro-orotique-deshydrogenase" et comme facteur 

 de croissance de L. bulgaricus 09. De plus, ce produit se distingue de I'acide dihydro-orotique d'origine 

 enzymatique par son spectre dans I'ultraviolet et ses proprietes chimiques. 



6. La signification des dihydropyrimidines dans le metabolisme des pyrimidines a ete discutee. 



ZUSAMMENFASSUNG 



1. Aus den Extrakten eines anaerobischen Bodenbakteriums, das durch Anreicherung einer 

 Kultur niit Orotsaure isoliert wurde, wurde ein Enzym teilweise gereinigt. Es wurde gefunden, dass 

 das Dihydro-orotsauredehydrogenase genannte Enzym die Reaktion 



Orotsaures Salz -f DPNH + H+ ^ Dihydro-orotsaures Salz + DPN 

 katalysiert. 



2. Das Produkt der enzymatischen Reduktion der Orotsaure wurde in kristalliner Form isoliert 

 und es wurde gezeigt, dass es die korrekte Elementaranalyse und das Aquivalentgewicht fiir Dihydro- 

 orotsaure besitzt; es wird bis auf weiteres als eine an der C^-Cj-Bindung gesattigte Dihydro-orot- 

 saure betrachtet. 



3. Das Reaktionsgleichgewicht begiinstigt sehr stark die Reduktion der Orotsaure; die Oxyda- 

 tion der Dihydro-orotsaure konnte nur mit Hilfe eines das DPNH entfernenden Systems gezeigt 

 werden. 



4. Dihydro-orotsaure war ebenso wirksam wie Orotsaure bei der Unterstiitzung des Wachstums 

 von Lactobacillus bulgaricus 09, eines Organismus, der Orotsaure und Ureidobernsteinsaure zur 

 Synthese von Nucleinsaurepyrimidinen beniitzt. 



5. Das Schmelzprodukt von Maleinsaure und Harnstoff, das die Elementarzusammensetzung der 

 Dihydro-orotsaure besitzt, war inert gegeniiber Dihydro-orotsauredehydrogenase und als Wachstums- 

 faktor fiirL. bulgaricus og. Es unterschied sich weiterhin von Dihydro-orotsaure enzymatischen Ur- 

 sprungs auf Grund seines Ultravioletspektrums und seiner chemischen Eigenschaften. 



6. Die Bedeutung der Dihydropyrimidine im Pyrimidinstoffwechsel wird besprochen. 



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