286 L. GORINI, F. FELIX, C. FROMAGEOT VOL. 12 (I953) 



partir des valeurs du Tableau II, est de I'ordre de 57,000 cal/mol. Cette energie, 

 tres superieure a celle d'une reaction d'hydrolyse enzymatique, est au contraire 

 comparable a celle de la reaction d'inactivation thermique precedemment calculee^. 

 Ceci suggere que I'hydrolyse par la trypsine du lysozyme actif est limitee par une 

 reaction analogue a celle qui se manifeste a des temperatures plus elevees en I'absence 

 de trypsine. Toutefois, il ne nous parait pas encore possible de dire quelle est la nature 

 de la reaction en question. Quoi qu'il en soit, le fait qu'il existe, dans les conditions 

 du Tableau I, un parallelisme entre la perte d'activite lysante et I'hydrolyse du lyso- 

 zyme actif sous Taction de la trypsine, montre que si le lysozyme actif, en presence 

 de trypsine, se transforme en une forme inactive avant d'etre hydrolyse, cette forme 

 inactive ne s'accumule pas dans le milieu. 



Influence du manganese 



La comparaison des constantes de vitesse d'inactivation en presence et en absence 

 de manganese (Tableau II) met en evidence Taction de ce metal. La diminution de vitesse 

 provoquee par le manganese est du meme ordre de grandeur que celle observee dans le 

 cas de Tinactivation thermique (vitesse environ dix fois plus petite pour Mn++io~2M)2. 

 Le manganese agirait ainsi soit en deplagant un equilibre eventuel vers la forme active 

 du lysozyme, soit en rendant cette forme active moins sensible a une action denaturante 

 ■de la trypsine, action s'exer^ant prealablement a son action hydrolysante'. L'influence 

 du manganese est d'autant plus remarquable que ce metal, comme le calcium, favorise 

 Taction proteolytique de la trypsine^'^'^** ; on aurait done pu s'attendre a ce que la proteo- 

 lyse du lysozyme s'accroisse au lieu d'etre inhibee. Mais on salt deja^ que l'influence que 

 les metaux ont sur une proteolyse par la trypsine est la resultante des actions qu'ils 

 €xercent sur Tune et sur Tautre des deux proteines en presence : la trypsine et son substrat. 

 Le Tableau III montre ce qui se passe dans le cas du lysozyme, soumis a Taction de la 

 trypsine en presence de manganese, de calcium et de magnesium. Le manganese exer9ant 

 son action surtout sur le lysozyme, diminue la proteolyse; le calcium depourvu d'action 

 sur le lysozyme, mais protegeant la trypsine, permet une proteolyse plus grande; le 

 magnesium etant pratiquement sans effet sur les deux proteines, n'influence pas la pro- 

 teolyse. 



TABLEAU III 



INFLUENCE DE CERTAINS IONS M^TALLIQUES SUR LA STABILITE 

 DU LYSOZYME EN PRESENCE DE TRYPSINE 



Lysozyme io~' M ; Trypsine 3- io~® M; Metaux lo""^ M; Temperature 36°. 



Action de la trypsine sur le lysozyme inactif 



L'etude de Taction de la trypsine sur le lysozyme ayant prealablement subi une 

 Bibliographie p. 288. 



