416 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



au contact de l'air, ne donne pas de culture, ce qui prouve 

 l'absence de microbes autres que les anaérobies. 



En passant à la presse les muscles, découpés en morceaux, 

 de ce cadavre oii s'est fait une culture prolongée du charbon 

 symptomatique, nous avons obtenu un suc musculaire que 

 nous avons débarassé des microbes par une filtralion sur une 

 bougie Ghamberland. Nous dirons tout de suite que, dans toutes 

 nos expériences sur la préparation de la toxine, nous avons 

 stérilisé nos liquides par filtration et non par la chaleur, qui 

 altère la substance active. 



Le liquide, ainsi obtenu, tue un cobaye (n''74, poids 530 gram- 

 mes), en trente heures, à la dose de 13 c. c. injectés dans le péri- 

 toine. Un autre cobaye (n° 7o, 620 grammes), qui en reçoit 

 10 c. c, est malade et se rétablit; éprouvé, six jours après, avec 

 une dose mortelle, ordinaire, du virus, il a une tumeur charbon- 

 neuse qui s'abcède et s'ouvre douze jours plus tard, mais il reste 

 bien portant. 



Cet essai nous ayant confirmé dans l'opinion qu'il suffit de 

 faire la culture du charbon symptomatique dans des milieux 

 riches en matières albuminoïdes pour avoir des toxines actives, 

 nous avons tâché de réaliser ces conditions artificiellement et 

 d'une manière plus simple. 



Le hacterium Chaucœi étant anaérobie, les cultures doivent 

 être faites à l'abri de l'air. Pour réaliser rigoureusement cette vie 

 sans air, nous avons eu recours à la technique employée à l'Ins- 

 titut Pasteur et qui consiste à faire le vide dans les vases de 

 culture au moyen d'une trompe à eau, puis à y laisser rentrer, à 

 diverses reprises, de l'hydrogène pour enlever les dernières traces 

 d'air. Au moyen d'un dispositif très simple, il est facile d'obtenir 

 des cultures anaérobies dans des vases de grande capacité et 

 avec une sécurité parfaite. Les vases de culture sont fermés au 

 chalumeau, soit quand il sont vides, soit sous une pression 

 d'hydrogène quelconque, mais inférieure à la pression atmosphé- 

 rique. Notre microbe dégageant des gaz, nous fermons sur le 

 vide. Lorsquele développement se faitbien, ledégagementgazeux 

 est abondant, la pression développée est assez forte pour avoir 

 amené une fois l'éclatement d'un de nos ballons. Celte augmen- 

 tation de pression est un signe de réussite delà culture; quand elle 

 n'existepas,il ne s'est pas formé de toxine en quantité appréciable. 



