418 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR. 



tige de verre flambée, assez avant dans le col, sur lequel on fait 

 deux étranglements, entre lesquels se trouve la bourre de coton. 

 Enfin, on fait le vide avec la trompe à eau, en laissant rentrer 

 trois à quatre fois l'hydrogène dépourvu d'oxygène, et on ferme 

 le ballon avec un petit chalumeau à main. 



Après un séjour de 2î heures à la température de 37°, 

 il y a déjà un changement visible produit par la culture. Toute 

 la masse est devenue d'une couleur rouge brique (celte couleur 

 disparait immédiatement au contact de l'air). Celte coloration 

 est un indice de la pureté de la culture. Celle-ci continuant à se 

 développer, la viande qui s'était agglomérée à l'autoclave ne 

 tarde pas à se désagréger, et, au bout de 10 jours, elle est 

 convertie en un liquide avec un fort dépôt grumeleux. Ce 

 liquide est extrêmement riche en microbes (qui se colorent bien 

 d'après le procédé de Gram) et en spores (qui restent incolores). 

 Une gouttelette ensemencée dans du bouillon ne doit pas 

 donner de culture au contact de l'air. Les gaz, dégagés par 

 les microbes, exercent une forte pression. Si on ramollit la pointe 

 effilée du ballon dans un bec Bunsen, il se produit une soufflure 

 et les gaz s'échappent et s'enflamment. Pour obtenir le plus 

 possible de substance active, nous avons d'abord décanté la partie 

 liquide. Le dépôt, recueilli dans un linge, fut soumis à la presse 

 pour exprimer le liquide qu'il contenait. Le tout réuni est filtré 

 d'abord sur du papier Chardin et enfin sur un filtre Chamber- 

 land. 



A quel moment faut-il mellre un ternie à la culture pour 

 avoir le plus de loxine? Car il est très possible qu'après avoir 

 élaboré leur poison, les microbes, continuant à vivre, le détrui- 

 sent ou le transforment en partie. 



Pour répondre à cette question, nous avons mis en train une 

 série de cultures en ballons, que nous avons ouverts à différents 

 intervalles. Le liquide d'un premier ballon, ouvert après 7 jours, 

 a donné les résulats suivants : 



10 c. c. ont tué le cobaye 103 (de GOO grammes), en 12 heures. 

 5 c. c. ont tué le cobaye lOi (de 580 grammes), en 30 heures. 



3 c. c. ont rendu malade le cobaye 111 (de 780 grammes), qui a 

 -survécu. 



4 c. c. ont fait mourir le cobaye 123 (de ioO grammes), en lOjours. 



5 c. c. ont tué le cobaye 115 (de 750 grammes), en moins de 15 heures. 



