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» La méthode que j'ai employée est la culture méthodique et suivie dans 

 un milieu rigoureusement privé d'azote, mais contenant une substance 

 fermentescible : une solution de sels minéraux, additionnée de sucre. L'eau 

 distillée et les sels ont été spécialement préparés pour ces expériences. Le 

 sucre était de la dextrose très pure, préparée d'après la méthode Soxhlet ; 

 elle ne contenait aucune trace d'azote. 



» La culture se faisait dans des matras à fond plat qu'on tenait sous de 

 grandes cloches ajustées à l'émeri sur des plaques de verre dépoli. L'air 

 extérieur ne pouvait y pénétrer qu'après avoir traversé des flacons-laveurs 

 remplis de potasse et d'acide sulfurique. Je me servais aussi d'appareils spé- 

 ciaux de culture, à large surface, fermés à l'émeri et parcourus par de l'air 

 filtré au travers d'une bourre de coton, de la ponce potassée et de la ponce 

 sulfurique, enfin lavé par de l'eau. 



» Les cultures faites dans ces conditions ont bientôt acquis des carac- 

 tères assez constants. Chaque fois on remarquait un dégagement de gaz, 

 la production d'un acide qui était en majeure partie de l'acide butvrique, 

 enfin la présence de masses zoogléiques mamelonnées, gonflées par les 

 bulles de gaz aussi longtemps qu'il y avait encore du sucre dans la solution. 

 Ces masses étaient formées par un grand bacille, contenant souvent des 

 spores. Tandis que les autres organismes, présents dans le liquide, mon- 

 traient des airs de souffrance non douteux, ces bacilles frappaient parleur 

 aspect absolument normal, leur coloration intense par les couleurs d'ani- 

 liue, ainsi que par la richesse relative de leur développement. 



» Je n'ai pas réussi jusqu'ici à isoler cet organisme (qui s'est montré 

 singulièrement réfractaire à la culture sur milieux gélatinisés) à l'état de 

 pureté complète ('). Deux autres espèces, bien distinctes, de bacilles sont 

 encore présentes dans le liquide, quoique leur développement y soit souvent 

 tout à fait insignifiant. Faut-il attribuer à ces bacilles une part d'action dans 

 le phénomène? Après les avoir isolés et étudiés à l'état de pureté, je ne le 

 crois pas. Leur développement dans les cultures mêlées est toujours pauvre, 

 quelquefois sûrement anormal. Ensemencés à l'état de pureté dans le même 

 milieu, rigoureusement dépourvu d'azote, ils n'y croissent pas; mais des 

 traces d'ammoniaque suffisent déjà pour provoquer une végétation assez 

 énergique. Ni l'un, ni l'autre ne donnent ni gaz, ni acide butyrique, qui 



(') L'emploi de la silice gélatineuse sucrée, qui paraissait le milieu le plus favo- 

 rable pour opérer la séparation, n'a pas encore conduit au but. Ces essais seront con- 

 tinués. 



