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 » Nous avons, pour suivre la marche de la sécrétion, adopté la méthode 

 suivante : 



» Nous prélevons, à divers moments de la germination, une vingtaine de grains que 

 nous broyons dans un mortier; nous y ajoutons 20" d'eau et quelques gouttes de 

 chloroforme. On laisse macérer pendant vingt-quatre heures à 3o°. On presse et l'on 

 filtre le liquide. On détermine dans le liquide filtré la quantité des substances actives. 



» A cet effet, on verse dans un tube à réactif 5o™ d'eau auxquels on ajoute o", i 

 d'acide formique normal et iS'' de caroubine pulvérisée. On mélange et on additionne 

 2", 5, 5", 10'^'=, i5'=° du liquide actif à analyser. S'il y a lieu, on amène le volume à Sc"^ 

 et l'on abandonne pendant trois heures à 45°. 



i> Tous les échantillons reçoivent une dose de chloroforme et sont préparés en double, 

 d'une part avec de l'infusion fraîche, d'autre part avec cette même infusion main- 

 tenue pendant une demi-heure à 90°. 



» On juge de l'activité de l'infusion par le degré de gélalinisation de celle-ci. Le 

 contenu des tubes, avecinfusion chauffée à 90°, est complètement gélatinisé; celui des 

 tubes, avec infusion active, est plus ou moins liquide. 



» 11 est aisé de se rendre compte du degré de lluidité du liquide : seuls, ceux qui 

 ont été additionnés d'une quantité suffisante de diastase traversent le filtre, tandis 

 que les autres ne passent pas. 



I) Par cette méthode, on voit que la sécrétion de l'enzyme est généra- 

 lement très faible pendant la période de germination proprement dite, et 

 qu'elle devient plus active dès que la plantule est munie de la chloro 

 phylle. 



)) Une infusion de germes en croissance, traitée avec cinq fois son vo- 

 lume d'alcool, fournit un précipité riche en azote et offrant toutes les 

 propriétés du liquide actif. 



) La caroubinase agit déjà énergiquement à [\o°, et son action augmente 

 avec la température jusqu'à So"; la température optima est entre 4^" et 

 5o°; à 70°, l'action devient très faible, et à 80" l'enzvme est détruite. 



) L'enzyme agit très faiblement dans un milieu neutre. 



)) Une addition de oS'',oi à 00', o3 d'acide formique pour 100 de liquide 

 favorise l'action de l'enzyme. 



» La caroubinase est à la fois agent liquéfiant et saccharifiant. 



' Par l'analyse de la gelée de caroubine soumise à l'action de l'enzyme, 

 on constate qu'au moment de la liquéfaction le liquide ne contient que 

 des traces de sucre réducteur, et que la substance réductrice augmente 

 au fur et à mesure que l'influence de l'enzyme se prolonge. 



» La caroubine liquéfiée par l'enzyme se précipite facilement par 

 l'alcool, mais le précipité n'a plus les propriétés de la caroubine : il est 



C. R. 1897, 2' Semestre. (T. CXXV, N° 2.) 16 



