318 Brunswik: Der mikrochemische Nachweis der Phytosterine. 39,4.' 



sterinestern und von Gemischen aus — ein Verfahren, das heute 

 allerorts geübt wird. 



Die mikrochemische Anwendung dieser Reaktion — der 

 einzigen Cholesterinprobe, die dem Behrens sehen Prinzip der Kristall- 

 fällung entspricht — für Pflanzen- und Tierobjekte liegt daher auf 

 der Hand. Die relative Seltenheit und der beträchtliche Preis des 

 Reagenses — Digitonin, Präparat von Merck — kommt gerade für 

 die Mikrotechnik nicht so sehr in Frage, da man mit den kleinsten 

 Mengen lange Zeit auskommt. 



Tatsächlich erweist sich eine alkoholische Digitoninlösung als 

 brauchbares, eindeutiges Mikrogruppenreagens für die Phyto- 

 sterine und tierisches Cholesterin. Die Empfindlichkeit ^ ist eine große -, 

 mit dem Trockenrückstand eines Tropfens von einer 0-00016"/o'o6n 

 (alkoholischen) Lösung von Cholesterin entsteht unter Deckglas 

 noch ein auffindbarer Kristallniederschlag innerhalb zweier Minuten 

 (= O'l x:= ug : Cholesterin !). 



Das Reaktionsprodukt, Digitonincholesterid, kristallisiert 

 meist in spitzen Einzelnadeln, Nadelbüscheln, Stachelkugelu, die manch- 

 mal fast in Sphäritbildungen übergehen können (bei starken Konzen- 

 trationen). Es läßt sich durch seine Löslichkeitsverhältnisse 

 identifizieren: unlöslich in Wasser, Aceton, Äther, praktisch unlöslich 

 in kaltem 85 — 96"/o Alkohol, leichter in kochendem abs. Alkohol 

 und in Methylalkohol, gut löslich in Eisessig (passende Umkristalli- 

 sationsprobe unter Deckglas damit !) und besonders gut löslich in 

 Pyridin. In Cloralhydrat 5:2 verschwinden die Kristalle von 

 Digitonincholesterid sofort. Von den üblichen FettfarbstofFen (Sudan III) 

 werden die Kristalle, wie zu erwarten, nicht tingiert. 



Die schönsten, nadeiförmigen Kristalle von Digitonincholesterid 

 erzielt man, wie diesbezügliche Versuche zeigten, mit einer ^j^^j^igen 

 Lösung von Digitonin in 85°/o Alkohol. Läßt man dieses 

 Reagens auf einige Cholesterinkriställchen unter Deckglas einwirken, 

 so erfolgt eine momentane Umsetzung in Digitonincholesterid, das in 

 Nadeln und Nadelbüscheln direkt an den Kristallkanten aufschießt. 

 In konserviertem Pflanzenmaterial (Glyzerin) vorkommende Kristall- 

 tafeln, wie sie Bertrand, F. G. Kohl (1902) und A. Meyer (1883) 

 erwähnen, lassen sich auf diese Weise leicht auf ihre Phytosterin- 



*) Vgl. hierzu die — makrochemischen — Angaben von A. Windaus, 

 h c, S. 111, und E. Sieburg und F. Bachmann, Über die Beeinflussung der 

 physiologischen Aktivität usw. (Biochem. Zeitschr. Bd. 126, 1922, S. 130—141). 



