38,0. Berek: Über selektive Beugung im Dunkelfeld, 241 



tlie beste bei Benutzung von Wellenlängen aus dem Bereiche 0'46 

 bis 0'54 /< mit dem Maximum bei 0*5 1 bis 0'52 /v, aber es trat hier- 

 bei keine Transformation der Lichtart ein: Während nämlich die an 

 der Eosinlösung beobachtete Lichtwirkung gegenüber der erregenden 

 Lichtart bandenförmig nach größeren Wellenlängen verschoben war, 

 zeigte die an dem mit Eosin gefärbten Mikroorganismus beobachtete 

 Lichtwirkung stets einfarbiges Licht von derselben Wellenlänge wie 

 die erregende Liclitart. Damit wird die Deutung der im ge- 

 wöhnlichen Dunkelf cid an gefärbten Mikroorganismen 

 beobachtbaren F a r b e r s c h e i n u n g e n als Fluoreszenz 

 liinfällig. 



Indes auch andere Beobachtungen , die im Dunkelfeld an ge- 

 färbten Mikroorganismen gemaclit werden können, zwingen dazu, die 

 Deutung der IMiänome als Fluoreszenz abzuweisen. Zuerst M. J. 

 Gross -^ und später eingehend H. Siedentopf- haben gezeigt, daß 

 alle diejenigen Objektive ihr volles, im Hellfeld nutzbares Auflösungs- 

 vermögen im Dunkelfeld nicht zur Geltung bringen können, deren 

 num. Apertur größer ist als ^/g der num. Apertur der Dunkelfeld- 

 beleuchtuug. Das hängt damit zusammen, daß von einer beugenden 

 Struktur, die bei äußerst schiefer Hellfeldbeleuchtung gerade noch 

 aufgelöst werden kann, bei Dunkelfeldbeleuchtung nicht mehr zwei 

 Beugungsmaxima vom Objektiv gleichzeitig aufgenommen werden 

 können. Der genannte Satz behält natürlich nur Geltung, wenn die 

 Abbildung durch lichtbeugende, nicht selbstleuchtende Strukturen zu- 

 stande kommt. Kommt dagegen eine Sichtbarmachung auf Grund 

 von Fluoreszenzerscheinungen zustande, so haben wir es mit einem 

 selbstleuchtenden, allseitig Licht ausstrahlenden Element zu tun. 

 Für das Auflösungsvermögen bei der Abbildung solcher selbstleuch- 

 tender Objekte ist aber, wie bei der Betrachtung der Fixsterne 

 mit dem Fernrohr, neben dem allgemeinen Korrektionszustand des 

 Objektivs lediglich die Größe seiner Beugungsaberrationen maßgebend. 

 Wären demnach die gefärbten Mikroorganismen im Dunkelfeld auf 

 Grund von Fluoreszenzwirkungen sichtbar, so dürfte die Auflösung 

 in diesem Bilde der Auflösung im Hellfeld zum mindesten nicht 

 nMchsteheu. Die Methode zeigt indes das gleiche verminderte Auf- 

 lösungsvermögen wie die Dunkeireldbeobachtung am ungefärbten 

 Präparat. Das ist aber meiner Ansicht nach ein weiterer Beweis 



1) Gross, M. J., Knowledge, 1912, .S. 37. 



-) Siedentopf, H., Zeitschr. f. wiss. Mikrosk. l'.d. 32, 1915, S. 20. 



Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie. 38, 3. lo 



