370 Kuhn-Steinberg: Die Agarfixierung von Bakterien. 38,4. 



wasserhaltigen Agar durchdringen muß, ehe sie zu den Amöben gelaugt 

 und daher in stark verdünntem Zustand einwirke und die Tiere nicht 

 augenblicklich abtöte. In der Tat ist aber die Diffusionsgeschwindig- 

 keit der Fixierungsmittel durch den Agar eine so bedeutende, daß 

 die Amöben in einer natürlich kriechenden am Glas flach ausgebrei- 

 teten Stellung vom Fixierungsmittel überrascht und sofort getötet 

 werden. Die Mikrophotogramme zeigen die lebensgetreue Erhaltung 

 der Amöben durch diese Fixierungsweise. Die Körper der einzelnen 

 Amöben stoßen wie im Leben dicht aneinander und sind nur durch 

 winzigste Schrumpfungslücken voneinander getrennt. Als besonderer 

 Vorteil dieser Methode ist hervorzuheben, daß man die Amöben vor 

 und während der Fixierung beobachten, ja bestimmte Amöbengruppen 

 im Leben wie nach dem Tode markieren und für besondere Unter^ 

 suchung vormerken kann. Als Fixierungsmittel bewährten sich Subli- 

 mat-Alkohol und 2\ige Osmiumsäure, die nach :> bis 10 Minuten 

 durch 50^/oigen Alkohol ersetzt wird, in dem noch 30 bis 60 Minuten 

 lang gehärtet wird. Dann wird das Deckglas vom Agar abgehoben 

 und mit Wasser abgespült. Der größte Teil der Amöben haftet nun 

 so fest an der Glasfläche, daß sie der Abspülung unter dem Strahl 

 der Wasserleitung widerstehen, der gleichzeitig die nur loser anhaf- 

 tenden Bakterien zum großen Teil abreißt. 



Zu dieser Methode riet Professor Kühn im Jahre 1916 in Straß- 

 burg i. E., als wir über die sogen. Mutation der Bakterien arbeiteten 

 und besonders die eigenartigen Gebilde untersuchten, die als Involu- 

 tionsformen und Degenerationsformen im Schrifttum bekannt sind. 



Wir begrüßten den Rat von Professor Kühn, da wir überzeugt 

 waren, daß die bisherigen Methoden der Bakteriologie nicht genügten, 

 um die Feinheiten im Bau der Bakterien zu ergründen. 



Die gewöhnliche Ausstrichmethode mit nachheriger Flammenfixie- 

 rung ist ausgesucht roh ; die Bakterien schrumpfen und bewahren 

 auch ihre Form nicht (vgl. Mikrophotogramme Abb. 1). Die Fixierung 

 der getrockneten Ausstriche im Alkohol ist etwas schonender, aber 

 immer noch recht grob. Die Bakterien schrumpfen klumpig zusammen 

 (vgl. Abb. 2). Auch die beste bisher geübte Fixierungsmethode, die 

 sogen, feuchte Fixierung, reicht nicht an die oben beschriebene 

 Agarfixierung heran, wie schon in den Ausführungen von v. Wasie- 

 LEWSKi und Kühn erwähnt wurde. Bei der feuchten Fixierung wird 

 ein Klatschpräparat von der Bakterienkultur hergestellt ; es wird sofort, 

 bevor es trocknet, in eine heiße Fixieruugsflüssigkeit z. B. Sublimat- 

 essigsäure gebracht, dann ausgewaschen und noch feucht in die Färb- 



