372 Kuhn-Sternberg: Die Agarfixierung von Bakterien. 38,4. 



lassen viel Einzelheiten erkennen, so Protoplasmahäiifungen und Körn- 

 chen (vgl. Abb. 4). 



Ein weiterer Vorteil liegt darin, daß man die Bakterien, lange 

 bevor das Wachstum mikroskopisch sichtbar ist, fixieren und färben 

 kann, also vom Beginn des Ausstrichs an. Um das zu ermöglichen, 

 zeichnet man auf der Rückseite der Agarplatte kleine Quadrate mit 

 Buntstift und nimmt den Ausstrich des Materials innerhalb der Qua- 

 drate vor. Die Quadrate werden zu verschiedenen Stunden heraus- 

 geschnitten, mit einem Deckglas bedeckt und wie angegeben fixiert. 

 So wird fortgefahren, bis sich deutliche Kolonien zeigen. Man er- 

 hält so auf diese Weise ein übersichtliches Bild von dem, was sich 

 während dieser Stunden beim Wachstum der Bakterien abspielt. 



Durch diese Methode gelang es über die Formen bei Bakterien 

 wertvolle Aufschlüsse^ zu erhalten. Sie kann auch dazu verwendet 

 werden, um irgendwelche Mikroorganismen in einer Flüssigkeit zu 

 färben. Man bringt in diesem Falle einen Tropfen der Flüssigkeit 

 auf eine sterile Agarplatte, läßt ihn einziehen, schneidet die Stelle 

 aus und bedeckt sie mit einem Deckglase. 



Neuerdings hat Carl Wiegand, Dresden -N., Hauptstraße 32, 

 Fixierplatten hergestellt (vgl. Abb. 5), welche feste Leisten tragen. 



Zusammenfassend sei noch einmal die Agarfixierungsmethode für 

 die Bakterienfärbung beschrieben : Aus der mit Bakterien besäten 

 Agarplatte wird zu der Zeit, in der man den Ausstrich untersuchen 

 will, ein Agarquadrat etwas kleiner als das Deckglas mit einem sterilen 

 Messer herausgeschnitten und vorsichtig ohne zu verschieben ein Deck- 

 gläschen darauf gelegt, das durch Erhitzen in heißer Metallschale 

 keim- und fettfrei gemacht ist. Man faßt das Deckgläschen samt 

 dem Agarquadrat mit der Pinzette und legt das Agarstückchen auf 

 zwei Glasbänkchen einer Fixierplatte. Der Hohlraum unter dem Agar 

 wird nun vermittelst einer dünn ausgezogenen und am Ende leicht 

 umgebogenen Glaspipette mit der Fixierungsflüssigkeit — außer Subli- 

 mat-Alkohol und Osmiumsäure haben wir mit Bichromat - Essigsäure - 

 gute Erfahrungen gemacht — angefüllt. Bei einer Dicke des Agars 

 von 2 mm, welche sich bewährt hat, muß die Fixierungsflüssigkeit 

 10 bis 15 Minuten einwirken. Dann wird sie mit der Pipette ab- 

 gesaugt und zunächst durch 75^/oigen, .50°/oigen und schließlich 

 25^/oigen Alkohol ersetzt in etwa ^/g Stunde. Der letzte Alkohol 



1) Vgl. Berlin, klin. Wochenschr. 1921, Nr. 13, S. 296. 



2) 100 Aqua dest., 3 g Kai. Bichromat., 5 com Eisessig. 



