37, 3. Schuscik: Zum Nachweis von Kalk im ossifizierenden Skelett. 223 



gelbe Pyrogallolverbindungen. Diese sind zwar löslich, aber schlecht 

 aus dem Gewebe extrahierbar. Es färbt sich daher der ganze Schnitt 

 leicht gelblich. Da Stellen mit geringem Calciumgehalt sich auch 

 nur gelblich färben, ist Vorsicht geboten. Ja Macallu^i (19) empfiehlt 

 geradezu, um sicher zu gehen, die Reaktion nur dort auf Kaiksalze 

 zu beziehen, wo man sie „auch unter Nichtberücksichtigung der Farb- 

 reaktiou , bereits nach dem Charakter der Gewebe zu schließen , zu 

 erwarten hat". Im allgemeinen ist die Färbung viel unansehnlicher 

 als die der Purpurine , aber dafür etwas empfindlicher. Auch hier 

 färben sich wieder die Ränder stärker. Müller -Präparate lassen 

 keine elektive', sondern nur eine difluse Färbung erkennen. Ein Aus- 

 blassen der Schnitte tritt nicht ein. Schmoul (.34 a) gibt an, keine 

 guten Resultate mit dieser Färbung erzielt zu haben. Ein direktes 

 Versagen der Reaktion ließ sich an meinem Material nicht beobachten. 

 Die zweite Gruppe der Kalkreaktionen umfaßt Färbungen, die 

 ausschließlich zum Nachweis des Calciumphosphates dienen sollen. 

 Die älteste von ihnen ist die Silberuitratmethode nach Kossa. Die 

 Schnitte werden nach folgender Vorschrift behandelt : 



a) 30 bis 60 Minuten bei hellem Tageslicht in 1 bis 5 ^o Silber- 

 nitratlösung. 



b) Auswaschen in destilliertem Wasser. 



c) Entfernen des überschüssigen Silbersalzes durch Eintauchen 

 in eine 5^Iq Lösung von unterschwefligsaurein Natron. 



d) Gründliches Auswaschen in destilliertem Wasser, Nachfärben 

 mit Safranin, Entwässerung, Balsam. 



Die Schnitte zeigen, so behandelt, zuerst eine Gelbfärbung der 

 verkalkten Gebiete, der bald eine Schwärzung folgt. Die Reduktion 

 der gelben zu einer schwarzen Verbindung tritt jedoch nicht ein, 

 wenn CaJciumphosphat im Reagensglas mit Silbernitrat versetzt wird. 

 Kossa konnte diese Reduktion erst durch Zusatz von eiweißhaltigen 

 Stoffen erzielen. Er schloß daraus, daß ein Teil des Gewebekalkes 

 an Albuminate gebunden sein müsse, da sonst die spontane Schwarz- 

 färbung im Schnitte nicht eintreten könnte. Tatsächlich läßt sich auf 

 die von Kossa angegebene Weise im Reagensglas der gelbe Nieder- 

 schlag binnen einiger Stunden in einen schwarzen verwandeln. Be- 

 nutzt man aber statt des Calciumphosphats das Carbonat, so tritt 

 ebenfalls zuerst ein gelber , wenn auch etwas hellerer Niederschlag 

 auf. Dieser geht jedoch im Licht in kurzer Zeit ohne irgendwelchen 

 weiteren Zusatz in eine grauschwarze Verbindung über. Verfolgt 

 man die Reaktion in einem hohlen Objektträger unter dem Mikroskop, 



