XVIII, 3. Referate. 307 



Die Lösung' des polychromen Methylenblaus enthält, wie man 

 vermöge der oben angegebenen Reaction mit Schwefelsäure leicht 

 erkennen kann, im wesentlichen nur Methylenazur. Schüttelt man 

 in einer Lösung von polychromem Methylenblau die durch Zusatz 

 von Natronlauge sich bildende rothe Azurbase * mit Aether aus, 

 so wird das Wasser farblos. Daraus ergiebt sich, dass unz er- 

 setztes Methylenblau im polychromen Methylenblau überhaupt nicht 

 mehr vorhanden ist ; im anderen Falle hätte die Flüssigkeit in Folge 

 des Gehalts an Methylenblau ihre blaue Farbe bewahren müssen. 

 Die LÖFPLER'sche Methylenblaulösung enthält stets mit dem Alter 

 der Lösung zunehmende Mengen von Methylenazur neben Methylen- 

 blau. Auch in reinen in Glasgelässen aufbewahrten Methylenblau- 

 lösungen ist Azur nachweisbar, da in Folge Alkaliabgabe von den 

 Wänden des Glases mit der Zeit eine Zersetzung des Methylenblaus 

 eintritt. 



Nach Michaelis beruht die Tinction des Chromatins bei der 

 RoMANOWSKY'schen Färbung nicht auf dem Vorhandeusein des eosin- 

 sauren Methylenazurs, sondern allein auf dem Methylenazur. Der 

 Zusatz von Eosin beschleunigt nur das Rothwerden der Chromatin- 

 substanzen, das auf einer eigenartigen Metachromasie des auch un- 

 gewöhnlich in einer blauen und rothen Modifikation (bei der Färbung 

 der Mastzelleugranula) auftretenden Azurs beruht. „Während bei 

 Färbung mit reinem Azur die blaue Modification erst allmählich in 

 die rothe umgewandelt wird, wird bei der Färbung mit eosin- 

 saurem Azur das Azur gleich in der ersten Modification vom Chro- 

 matin abgespalten." 



Obwohl das Vorhandensein von reinem Methylenblau in der 

 Lösung entgegen der früheren Annahme von Nocht zum Zustande- 

 kommen der Rothreaction überflüssig ist (Michaelis erhielt die Re 

 action auch bei Färbung mit dem in Wasser gelösten Niederschlage, 

 der bei der Vermischung von Eosin und Methylenazur entsteht), so 

 bevorzugt Michaelis doch einen Zusatz von reinem Methylenblau 

 zur Azurlösung im Interesse einer intensiven Contrastfärbung. Eine 

 azurhaltige Methylenblaulösung stellt Michaelis nach der NocH'r'schen 

 Methode (Erhitzen einer Methylenblaulösimg mit Alkali, folgende 

 Neutralisation mit Essigsäure) folgendermaassen her : Lösung von 2 g 



: ) Diese ist in Folge der Gegenwart von freiem Alkali, namentlich in 

 concentrirten Lösungen stets in geringen Mengen vorhanden und bewirkt 

 die „Rothstichigkeit" des polychromen Methylenblaus. 



20* 



