ACADEMIA DK CIENCIAS DE LA HABANA 107 



parte de dicho cultivo á fin de preci[Htar en el fondo 

 del tubo de la centrífuga los gérmenes de gran tama- 

 ño contenidos en el agua y sólo quedasen en la super- 

 ficie del líquido los pequeños dotados de movilidad 

 como el bacilo de Ebertíi, coli-communi, etc. Con es- 

 te líquido hicimos las siembras en placa en el siguien- 

 te medio nutritivo. 



En el agua peptonizada al 3% se disuelve al calor el 

 2% de agar; se neutraliza con subcarbonato de sosa y 

 se purifica por decantación en el autoclave bajo la 

 presión de una y media atmósfera durante media ho- 

 ra, segiin nuestro proceder general para preparar el 

 agar. 



Fundido nuevamente al baño-maría á 46® de tem- 

 peratura 50 ce. en un pequeño frasco de Erlenmeyer, 

 le añadimos 2tVc. c. de una solución acuosa de ácido 

 fénico cristalizado á 1.40 y 24 ce. de este agar fénica-, 

 do lo repartimos entre doce tubos de ensayo, tapa- 

 dos con algodón y previamente esterilizados, los cua-, 

 les, para que mantuviesen fundido el agar los deja- 

 mos colocados en el mismo baño-maría á 46° de tem-f 

 peratura hasta verificar la siembra que hicimos inme- 

 diatamente. 



La siembra de esos doce tubos fué hecha mojando 

 solamente tres veces la aguja de platino en el caldo 

 de cultivo centrifugado, para obtener así una especie 

 de cultivo por dilución. Efectuada ésta, se agitó el 

 tubo para esparcir uniformemente en toda su pared 

 el agar perfectamente fundido y colocado después con 

 el fondo hacia arriba el exceso del agar salió, quedan- 

 do tan sólo en él una película tan delgada y transpa-. 

 rente como si fuese una placa fotográfica. El tapón 

 de algodón se sustituvó por un capuchón de goma 

 esterilizado, á fin de evitar la desecación de la j^laca 

 al dejar, como se hizo, dichos tubos sembrados en la 

 estufa á 37° de temperatura. 



A las 17 horas de permanecer en la estufa, todos 

 los tubos habían germinado, presentando colonias 

 más ó menos confluentes que aparecían á simple vista 

 como puntos pequeños, opacos, blanco amarilloso, y 

 de bordes perfectamente circunscritos. Eos tubos en 

 que las colonias eran menos confluentes fueron las 



