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i ig. !. Verfahren zur Gewinnung reinen Sporenmaterials. 



und Bakterien infiziert. Daher wurde dasselbe Verfahren noch ein paarmal wiederholt, bis 

 die Kulturen von fremden Pilzen frei waren. Dann erst erfolgte die Überimpfung auf Mistagar 

 in Petrischalen. Völlig reine Sporen gewann ich auf folgendem Wege. Impft man das in 

 einer Petrischale erstarrte Nährsubstrat in der Mitte, so breitet sich das Boudieramyce] in kurzi c 

 Zeit nach allen Seiten aus. Wenn auch die Mitte des Mycels stark mit Bakterien infiziert 

 ist, so kann man trotzdem am Rande der Schale die Hyphen stellenweise völlig oder fasi 

 völlig bakterienfrei finden. Wartet man. bis in solchen Bezirken die Sporenreife eintritt — 

 ein Blick an der betreffenden 

 Stelle durch den Deckel der Petri- 

 schale bei schwacher Vergröße- 

 rung zeigt das, da die Schläuche 

 ihre Sporen massenweise an die 

 Deckelunterseite schießen — , so 

 braucht man nur in der durch 

 Textfigur 1 illustrierten Weise eine 

 sterile Platinöse von nicht zu geringer Größe, die in sterilen Mistagar getaucht ist, in die 

 Schale einzuführen und sie einige Zeit — unter günstigen Umständen genügen 5 Minuten — 

 in der betreffenden Lage zu lassen. Dann kann man die angeschossenen Sporen in einen 

 sterilen Nährboden überimpfen. Es empfiehlt sich, die Impfung stets durch einen Stich in 

 die Mitte des Substrates auszuführen, da sich dann die Mvcelien sehr gleichmäßig entwickeln 

 und gleichalterige Fruchtanlagen und Früchte sehr bequem zu entnehmen sind. 



4. Die Beobachtung bietet mannigfache Schwierigkeiten. In ihren wesentlichen 

 Zügen ist die Entwickelung des Pilzes schon durch Beobachtung während seines Wachstums 

 in Petrischalen klar zu legen. Indessen, da stärkere Vergrößerungen nicht anwendbar sind, 

 weil der Pilz ein wenig aus dem Substrat hervorragt und die Frontlinsen der Objektive 

 jeden Augenblick entweder beschlagen oder beschmutzt sind, kommt man über ein unge- 

 fähres Bild nicht hinaus. Auch die Kultur im hängenden Tropfen in kleiner Böttcher 'scher 

 Kammer führt nicht zum Ziel, denn in der dünnen Substratschicht bilden sich wenio- oder 

 keine Früchte aus, und die wenigen, die sich bilden, ragen aus dem Substrat hervor und 

 sind infolgedessen mit stärkeren Systemen nur unvollkommen zu beobachten. Daher ließ 

 ich mir die schon erwähnten größeren Kammern machen und goß das Nährsubstrat etwa- 

 dicker aus. Die Beobachtung mit stärkeren Systemen ist zwar dadurch ebenso wie bei An- 

 wendung der kleinen Kammern und Petrischalen ausgeschlossen, aber in diesen Kammern 

 bilden sich viele Frachtkörper, und man behält die Möglichkeit einer dauernden mikrosko- 

 pischen Kontrolle bei schwächerer Vergrößerung (Zeiss, Apochromat-Obj. S mm. Compens.- 

 Okular 4, 0, höchstens 8). Störend ist hierbei nur die wenig günstige Beleuchtung infolge der 

 großen Entfernung (10 mm; der Kulturschicht vom Kondensor. Die vom Kondensor konzen- 

 trierten Lichtstrahlen haben ihren Vereinigungspunkt bereits überschritten, wenn sie auf die 

 Agarschicht treffen. Durch den Rollet'schen Kondensor Zeiss Kat. über Mikroskope und 

 mikroskopische Hilfsapparate, 32. Ausgabe, S. 30, 9) ist dieser Übelstand zu beseitigen. Da 

 ich über einen solchen nicht verfügte, verwandte ich künstliche Beleuchtung Auerbrenner 

 und schaltete zwischen den Mikroskopspiegel und die Lichtquelle den Zweilinsenteil eines 

 Zeiss sehen Projektionsapparates (Zeiss, Spez.-Kat. über Apparate für Projektion und Mikro- 

 photographie. 4. Ausg. 1899. Nr. 287. II) ein. Durch Probieren findet man leicht die gün- 

 stigsten Beleuchtungsverhältnisse heraus. 



Die Methode reicht aus, um die Entwickelungsstufe einer Fruchtanlage oder Frucht 

 annähernd festzustellen. In solchen Kammern wurde die ganze Entwickelung von einer 



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